罗制精品-3.1菊花组织培养.ppt

菊花组织培养的实验操作程序 （一）制备MS固体培养基 2.外植体的生理状态是成功进行组织培养的重要条件之一。 生长旺盛的嫩枝生理状况好，容易诱导脱分化和再分化。 你打算做几组重复？ 你打算设置对照实验吗？ 设置对照实验，可以取用一个经过灭菌的装有培养基的锥形瓶，与接种操作后的锥形瓶一同培养，用以说明培养基制作合格，没有被杂菌污染。 答：每种材料或配方至少要做一组以上的重复。 第36页－练习题1 1. 植物组织培养所利用的植物材料，体积小、抗性差，对培养条件的要求较高。用于植物组织培养的培养基，同样适合于某些微生物的生长，如一些细菌、真菌等的生长。而培养物一旦受到微生物的污染，就会导致实验前功尽弃，因此要进行严格的无菌操作。 第36页－练习题2 * 专题三　植物的组织培养技术 舞钢市一高 罗瑞锋 菊花的组织培养 课题背景 ①植物细胞或组织，发育成完整植株，需要什么条件？ ②什么叫植物细胞的全能性？ （1）概念：具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞，具有发育成完整个体的潜能。 １.植物细胞全能性表现的条件： 离体、适宜营养、一定比例的激素、 无菌条件、适宜温度、光照 　当植物细胞，脱离了原来所在的植物体的器官或组织，而处于离体状态时，在一定的营养物质、激素和其它外界条件的作用下，就可能表现出全能性，发育成完整植株。 ２.植物细胞具有全能性 （3）过程机理：在特定条件刺激下，在特定的时间和空间里，基因（遗传信息）选择性地表达出了特定的结构和功能蛋白。 （2）原因：细胞内，含有某种生物全部遗传信息 ①植物细胞全能性的表现为什么一定需要离体条件？ （一）植物组织培养的过程： １、细胞的分化（必修1－第117～118页） （1）概念： 在植物的个体发育过程中，由一个或一种细胞增殖的后代，在形态、结构、生理功能上发生稳定性差异的过程。 （3）机理： （2）过程： 受精卵增殖、生长、分化形成组织、器官、系统 基因在特定的时间和空间里，选择性地表达出了特定结构和功能的蛋白质。 基因表达的程序，在个体发育的很早时期，就已经预定下来，由于机体各部位间分工协作的需要，原预定程序是不可更改的。所以，在生物体内，已经分化的细胞是不可能表现出全能性的。 即在个体发育的不同时期，生物体不同部位的细胞表达的基因不同，合成了不一样的蛋白质。 （4）细胞分化的特点： ①持久性： 细胞分化是一种持久性的变化，一般来说，分化了的细胞将一直保持分化后的状态，直到死亡。 ②普遍性： 由于不同生物细胞分化的机理是大致相同的，所以细胞分化现象，在具细胞结构的生物体内是一种普遍存在的生理现象。 ③重要性： 多细胞植物体的细胞分化，是建立在有丝分裂基础上的，如果只有细胞分裂，细胞彼此一样，生物体的各部分之间，就不能进行分工协作了。正是有了细胞分化，才使多细胞生物体中的细胞趋向专门化，才能提高了机体各种生理功能的效率。 ③全能性： 多细胞植物内已分化细胞，尽管形态、结构和功能各异，但它们都由一个细胞（如受精卵）有丝分裂来的，细胞内仍保留着某种生物的全部遗传信息，仍具有发育成完整新个体的潜能。 2、植物组织培养的基本过程 离体条件下，尽管有改变细胞内原来预定的基因选择性表达程序的可能，但要让离体细胞发育成完整的植株，并不容易。 离体的植物组织或细胞 外植体 有丝分裂 脱分化 愈伤 组织 长出丛芽 生根 移栽成活 长成植株 再分化 ①外植体： 从活植物体上切下，用于进行离体培养的植物器官或组织片段。 ②愈伤组织: 细胞排列疏松而无规则,是高度液泡化的、呈无定形状态的薄壁细胞 ③脱分化： 脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官，这个过程叫再分化。 由高度分化的植物组织或细胞，产生愈伤组织的过程。 ④再分化： 启动脱分化、再分化，往往需要使用植物激素，人为地进行控制；其中细胞分裂素、生长素是关键激素。 （二）影响植物组织培养的因素： 1.植物材料的选择 （1）不同的植物组织，培养的难易程度差别很大 烟草和胡萝卜的组织培养较为容易 枸杞愈伤组织的芽诱导比较难 （2）同一植物材料的年龄、保存时间的长短会影响实验结果 菊花的组织培养，一般选择未开花植株的茎上部，新萌生的侧枝。 （内因） 2.不同的离体组织和细胞对营养、环境等条件的要求相对特殊，需配置不同的培养基 （外因） MS培养基配方（P84页，附录3－八） A、大量元素: N、P、 S 、 K、Ca、Mg等 B、微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、 Co 、I、 Mo等 C、有机物、植物激素 MS培养基主要成分包括： ①你能说出各种营养物质的作用吗？ ②同专题2中微生物培养基的配方相比，MS培养基的配方有哪些明显的不同？ 微量、大量元素：提供植物细胞生活所必需的无机盐； 蔗糖：提供碳源，同时能够