4流式娜细胞术的参考样品.pptVIP

流式细胞术的参考样品 河北省肿瘤研究所 * * 一· 参考标准样品在FCM使用的意义 参考标准样品在FCM中使用，为了监测仪器的液流·电子和各个光学系统的稳定性，校正和调试仪器的CV值，最大限度的提高仪器的分辨能力． 1.调整仪器在高性能的状态下工作。 2.由于FCM的测量是相对的，而不是绝对的，所以参考细胞有助于单个样品或一组样品的测量参数的解释。 3.参考标准细胞可供监测工作状态下仪器的稳定性，以使所测参数具有可靠性和可比性。 4·参考细胞可被用于监测染色过程。 5·能够用于校验FCM分选术的回收和纯度。 参考细胞的主要作用如下: 二、 标准细胞样品具备的特性 一个标准样品，应具有较恒定的体积大小 具有较恒定荧光发射量子 细胞的形状较一致 在液流中的流动取向较一致 在悬液中可保持高度的单分散状态，放置较长时间不会聚集、不改变其形状、体积大小及其光学特性 1. 外标法 标准样品在流式分析实验样品前或后，上仪器测量，以校正仪器在工作条件下稳定性。 缺点 由于参考样品与实验样品不同步染色，以及在实验过程中仪器条件的漂移，可能引起定量检测的误差，因此，近年在流式细胞定量检测中已被摒弃。 参考标准的使用方法 2. 内标法 内标法是将标准样品与实验样品按一定的细胞数混悬在一起进行同步染色,这种方法可以避免外标法引入的误差,可以避免因染色、光源强度的瞬时波动，以及细胞