4-2蛋作白质技术.pptVIP

蛋白质技术 1.蛋白的分离纯化技术 (略) 2.蛋白的检测技术 (1)SDS(2) Western blot (3) ELISA (4) 蛋白芯片 (5)蛋白测序 (略) (6)双向电泳新基因的获取技术 (7)蛋白质磷酸化分析 (8) EMSA 蛋白与核酸相互作用的研究(功能) (9)免疫共沉淀技术 (CoIP) 蛋白与蛋白相互作用的研究(功能) (1) SDS电泳 1、原理 2、用途 SDS电泳原理 1.SDS(带负电)和还原剂破坏蛋白的高级结构, 同时SDS与蛋白定量结合, 消除蛋白之间的电荷差异,使得蛋白的迁移率主要依赖分子量 (分子小跑得快) . 2.不连续电泳: 上层为浓缩胶,可将样品压缩到同一起跑线, 下层为分离胶; 可获得更高的分辨率. 3.考马斯亮蓝进行染色. SDS电泳用途 1.蛋白分子量的测定 2.蛋白浓度的测定 3.蛋白的鉴定(通过1来实现) (2). Western blot (4) 蛋白芯片 (6) 双向电泳 双向电泳是蛋白质组学中对蛋白质组进行研究的主要分离方法，同时能分离成百上千种蛋白质。蛋白质在第一向根据电荷的不同（等电聚焦），第二向根据分子量的不同进行分离（SDS）。分离后对蛋白质进行染色，根据实际分析情况，分别进行考马斯亮兰染色、银染或荧光染色。扫