2018年还原糖的滴定.docVIP

还原糖的滴定 　　还原糖的测定方法 　　食物中还原糖的测定方法：高锰酸钾滴定法 　　1. 原理 　　样品经除去蛋白质后，其中还原糖在碱性环境下将铜盐还原为氧化亚铜，加硫酸铁后，氧化亚铜被氧化为铜盐，以高锰酸钾溶液滴定氧化作用后生成的亚铁盐，根据高锰酸钾消耗量计算氧化亚同含量，再查表得还原糖量。 　　2. 仪器 　　（1） 滴定管 　　（2） 25ml古氏坩埚或G4垂融坩埚 （3） 真空泵 （4） 水浴锅 　　3. 试剂 　　3.1 6 mol/L盐酸：量取50ml 盐酸加水稀释至100 ml。 　　3.2 甲基红指示剂：称取10mg 甲基红，用100ml 乙醇溶解。 　　3.3 5 mol/L氢氧化钠溶液：称取20g 氢氧化钠加水溶解并稀释至100ml 。 　　3.4 碱性酒石酸铜甲液：称取34.639g 硫酸铜（CuSO4·5H2O ），加适量水溶解，加0.5ml 硫酸，再加水稀释至500ml ，用精制石棉过滤。 　　3.5 碱性酒石酸铜乙液：称取173g 酒石酸钾钠与50g 氢氧化钠，加适量水溶解，并稀释至500ml ，用精制石棉过滤，贮存于橡胶塞玻璃瓶中。 　　3.6 精制石棉：取石棉先用3mol/L盐酸浸泡2～3天，用水洗净，再加2.5mol/L氢氧化钠溶液浸泡2～3天，倾去溶液，再用热碱性酒 　　石酸铜已液浸泡数小时，用水洗净。再以3 mol/L 盐酸浸泡数小时，以水洗至不呈酸性。然后加水振摇，使成微细的浆状软县委，用水浸泡并贮存于玻璃瓶中，即可用做填充古氏坩埚用。 　　3.7 0.1000mol/L高锰酸钾标准溶液。 　　3.8 1mol/L氢氧化钠溶液：称取4g 氢氧化钠，加水溶解并稀释至100ml 。 　　3.9 硫酸铁溶液：称取50g 硫酸铁，加入200ml 水溶解后，慢慢加入100ml 硫酸，冷却后加水稀释至1L 。 　　3.10 3mol/L盐酸：量取30ml 盐酸，加水稀释至120ml 。 　　4. 操作方法 　　4.1 样品处理： 　　（1）乳类、乳制品及含蛋白质的食品：称取约0.5～2 g固体样品（吸取2～10 ml液体样品），置于250 ml容量瓶中，加50 ml水，摇匀。加入10 ml碱性酒石酸铜甲液及4 ml1mol/L氢氧化钠溶液，加水至刻度，混匀。静置30min ，用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，滤液备用。 　　（2） 酒精性饮料：吸取100 ml样品，置于蒸发皿中，用1 mol/L氢氧化钠溶液中和至中性，在水浴上蒸发至原体积1/4后（注：如果蒸发时间过长，应注意保持溶液pH 为中性），移入250 ml容量瓶中。加50 ml水，混匀。 　　（3） 含多量淀粉的食品：称取2～10 g样品，置于250 ml容量瓶中，加200 ml水，在45℃水浴中加热1 h，并时时振摇。（注意：此步骤是使还原糖溶于水中，切忌温度过高，因为淀粉在高温条件下可 　　糊化、水解，影响检测结果。）冷却后加水至刻度，混匀，静置。吸取200 ml上清液于另一250 ml容量瓶中。 　　（4）含有脂肪的食品：称取2～10 g样品，先用乙醚或石油醚淋洗3次，去除醚层。加入50ml 水混匀， 　　（5）汽水等含有二氧化碳的饮料：吸取100 ml样品置于蒸发皿中，在水浴上除去二氧化碳后，移入250 ml容量瓶中，并用水洗涤蒸发皿，洗液并入容量瓶中，再加水至刻度，混匀后，备用。 　　4.2 样品测定： 　　吸取50ml 处理后的样品溶液，于400ml 烧杯中，加入25ml 碱性酒石酸铜甲液及25ml 乙液，于烧杯上盖一表面皿，加热，控制在4min 内沸腾，再准确煮沸2min ，乘热用铺好石棉的古氏坩埚或G4垂融坩埚抽滤，并用60℃热水洗涤烧杯及沉淀，至洗液不成碱性为止。（注：还原糖与碱性酒石酸铜试剂的反应一定要在沸腾状态下进行，沸腾时间需严格控制。煮沸的溶液应保持蓝色，如果蓝色消失，说明还原糖含量过高，应将样品溶液稀释后重做。）将古氏坩埚或垂融坩埚放回原400ml 烧杯中，加25 ml硫酸铁溶液及25ml 水，用玻棒搅拌使氧化亚铜完全溶解，以0.1mol/L高锰酸钾标准液滴定至微红色为终点。 同时吸取50ml 水，加与测样品时相同量的碱性酒石酸铜甲、乙液，硫酸铁溶液及水，按同一方法做试剂空白实验。 　　5. 计算： 　　X1=（V-V0）×N ×71.54 （1） 　　式中： X1--样品中还原糖质量相当于氧化亚铜的质量，mg ； 　　V--测定用样品液消耗高锰酸钾标准液的体积，ml ； 　　V0--试剂空白消耗高锰酸钾标准液的体积，ml ； 　　N--高锰酸钾标准溶液的浓度； 　　71.54--1ml 1mol/L高锰酸钾溶液相当于氧化亚铜的质量，mg 。 再计算样品中还原糖含量。 　　X2=（m1×V2）∕（m2×V1