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培养液中酵母菌种群数量的变化 基 础 回 扣 1、酵母菌 酵母菌是单细胞真核生物。 生长周期短,增殖速度快, 还可以用酵母菌作为实验材料研究(探究酵母菌的呼吸方式,判断细胞的死活探究膜的透性) 2、种群数量的变化 种群数量的变化包括增长、波动、稳定、下降等 “S”型曲线有一个K值,即环境容纳量。 种群数量的增长也受到许多环境因素(如温度、培养液的pH、培养液的养分种类和浓度、代谢产物等)的影响。 探究过程 1.提出问题: 2.作出假设: 3.设计实验: 4.进行实验: 5.分析结果和 表达交流: 6.得出结论: 培养液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的? 酵母菌在开始一段时间呈“J”型增长,随着时间的推移,由于资源和空间有限,呈“S”型增长。 连续培养5天,每天用显微镜和血球计数板计数出酵母菌种群密度 各小组汇报实验结果,结合前4天的结果,画出酵母种群增长的曲线图并进行分析。 酵母菌在开始一段时间呈“J”型增长,但随着时间的推移,由于资源和空间有限,将呈“S”型增长,并最终将全部死亡。 3.设计实验: ①将10mL无菌马铃薯培养液或肉汤培养液加入试管中; ②将酵母菌接种入试管中的培养液中混合均匀; ③将试管在28℃条件下连续培养5d; ④每天取样计数酵母菌数量; ⑤分析结果,得出结论。 是否设置对照组和多组重复实验? 如何取样计数?记录表怎样设计?计数时有哪些注意事项? 计数室 计数室(中间大方格)的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,其体积为______mm3 ,合_________mL。 1mm 0.1 1×10-4 血球计数板:一种专门计数较大单细胞微生物的仪器 计数室 计数室分为25中格(双线边) 每一中格又分为16小格 计数室是由___________个小格组成 25×16=400 如何计数? 五点取样法 样方法 每mL培养液中酵母菌数量= =A (平均每个中格酵母细胞数)×25×104 ×稀释倍数 A1 A2 A5 A3 A4 第 1 天 第 4 天 第 6 天 第 7 天 死亡 酵母菌数量变化记录表 计数时有哪些注意事项? ①从试管中吸出培养液进行计数之前,要将试管轻轻震荡几次; 如果酵母菌浓度过大,应先稀释。 ②对于压在中格界线上的酵母菌,一般只取相邻两边及夹角计数; ③对于已经出芽的酵母菌,芽体达到母细胞大小一半时,即可作为两个菌体计算;已死亡的酵母菌不计数※。 ④每个样品一般计数三次,取其平均值。 培养液中酵母菌种群数量的变化 死亡 在计数前,还应有哪些步骤?需注意些什么? 培养液配制 灭菌 接种 培养 无菌操作 培养条件 试管编号 培养液/mL 无菌水/mL 酵母菌母液/mL 温度(℃) A 10 — 0.1 28 B 10 — 0.1 5 C — 10 0.1 28 针对“培养液中酵母菌种群数量的动态变化”,有人提出了新的问题,某同学按下表完成了有关实验。 温度、营养物质对酵母菌生长的影响 试管编号 培养液/mL 无菌水/mL 酵母菌母液/mL 温度(℃) A 10 — 0.1 28 B 10 — 0.1 5 C — 10 0.1 28 以计数酵母菌为例 (1)用血球计数板计数酵母菌悬液的酵母菌个数.(2)样品稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数,以每小方格内含有4-5个酵母细胞为宜,一般稀释10倍即可. (3)将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上加盖专用的厚玻片.(4)将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘,使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸水纸吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室内. 血球计数板的使用 (5)计数时,如果使用16格×25格规格的计数室,要按对角线位,取左上,右上,左下,右下4个中格(即100个小格)的酵母菌数.如果规格为25格×16格的计数板,除了取其4个对角方位外,还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数. (6)当遇到位于大格线上的酵母菌,一般只计数大方格的上方和左方线上的酵母细胞 (7)对每个样品计数三次,取其平均值,按下列公式计算每1ml菌液中所含的酵母菌个数. 3.计算公式 (1)16格×25格的血球计数板计算公式:酵母细胞数/ml= 100小格内酵母细胞个数/100×400×104×稀释倍数 (2)25格x16格的血球计数板计算公式:酵母细胞数/ml= 80小格内酵母细胞个数/80×400×104×稀释倍数 怎样进行酵母菌的计数? 对一支试管中的培养液(可定为10ml)中的酵母菌逐个计数是非常困难的,可以采用抽样检测的方法:先将盖玻片放在计数室上,用吸管吸取培养液,滴于盖玻片边缘,让培养液自行渗入,多余培养液用滤纸吸去,稍待片刻,待酵母菌细胞全部沉降
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