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定 标 CALIBRATION 科联国际有限公司 一.定标的意义 定标的意义: 定标就是要找出一个参考点,就是一个K值(或F值)。 K值就是我们通过定标找出来的,一般最低要求是有试剂空白与标准品。经过仪器测定出两个吸光度: 标准浓度-试剂空白 K= ————————— A标准-A试剂空白 (试剂空白通常是0) K值实际上代表斜率,试剂空白代表截距 影响K值决定因素: 标准液的浓度一定要准确(标准液最好与标本一样是以血清为基质的) 标准液的吸光度与试剂空白的吸光度一定要准确 标准值的准确性(影响K值的决定因素) 标准值的准确性直接关系到测定样本结果的准确 测定值=(A测定-A试剂空白)× K 标准液的溯源性 方法学的溯源性与相应试剂的稳定性与精密度 仪器符合相关标准 例如:吸光度的准确性、稳定性、重复性、线性范围杂散光等,加样准确度与波动,温度准确与波动及携带污染率要求。 吸光度的准确性(影响K值的决定因素) 吸光度的准确性的决定因素:仪器、试剂 如何确定K值的准确性? 用两种水平的质控品来检查。如果检查结果很好。 酶的项目如何确定K值 理论K值的计算: TV×1000 K=—————— SV×L×ε 用有酶类项目的定标液得出K值:OLYMPUS公司可以提供多项目的定标液(不仅有底物类的项目,也有酶类项目) 三.准确的操作 运输、保存、复溶: 避免外界温度、光线的影响及外源性的污染 仪器的最佳状态 试剂的质量 正确的参数设置 Crew On Board and Cal stability Urea On Board and Cal stability 四.定标失败的常见原因 仪器不执行定标 仪器执行定标,但定标失败。 定标完成,但测定样本结果不理想,质控失控。 仪器不执行定标 全部项目都没有执行定标时,报警ACAL incomplete 原因:没有选择定标项目或在选择定标项目确定后再进行 试剂复位,这时已选的定标项目消失。(新软件) 个别项目没有定标 原因:1)无该项试剂 2)没有准备预稀释液(需要预稀释液的项目) 3)校正品的放错位、定标架条形码贴错 c) 定标架不进入仪器通道 原因:设置使用有条形码的标准样本进行分析 没有准备预稀释液(需要预稀释液的项目) 例如:做APOA1需要把标本预稀释10倍,如果没有准备稀释液或加了稀释液,但没有检查稀释液,定标操作都不会成功。 校正品放错位或定标架条形码贴错 (P)Parameter → (B)Calibration → (I)Calibration Specific 如:ALB应放在定标架1号位,Rack ID 0001 Rack ID 0002第一孔显示11号位 仪器执行定标,但定标失败 定标因素超过限制范围 定标因素=标准浓度(CONC)/ 吸光度(OD) 定标因素查看(ALB定标因子L:54;H:88) (P)Parameter → (B)Calibration → (I)Calibration Specific 错误的定标因子(L:-2.0;H:2.5) 在P-B-I 定标参数中,因数范围过窄,先报Calibration Factor Over Range,后报Calibration Error。 正常的定标的因子数 ALB因子数:70.77903 试剂空白超出设定范围或波长设定错误(Y、y、U、u) Rate法的项目线性不好、范围设置不正确(*)或波长设定错误 范围设定查看:(P)Parameter → (I)Specific Test Parameters 试剂空白查看:
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