细菌的感染与致病性.ppt

致育因子（fertility factor） F质粒 与有性生殖有关 带有F质粒的为雄性菌，能长出性菌毛；无F质粒的为雌性菌，无性菌毛 高频重组菌（high frequence recombination, Hfr）：F质粒整合到宿主染色体的菌株 F’因子：Hfr菌株上的F因子通过重组恢复成自由状态时，有时可将其相邻的染色体基因一起切割下来，成为携带某一染色体基因的F因子，将携带不同基因的F因子统称为F’。 耐药性质粒 编码细菌对抗菌药物或重金属盐类的耐药性。 毒力质粒（Vi质粒）（virulence plasmid） 编码与该菌致病性有关的毒力因子。 细菌素质粒 编码各种细菌产生的细菌素。 代谢质粒 编码产生相关的代谢酶。 人工构建的质粒 1.人工构建质粒的目的： 人工构建的质粒主要用于基因工程技术，在该技术中质粒主要被用作载体。 基因工程的程序： （1）获取所需要的基因 （2）将目的基因与载体连接 （3）将重组DNA导入到受体细胞，外源基因得到表达。 2.基因工程载体必须具备下列条件： 1）环状DNA结构 2）具有限制性内切酶的位点，以便与外源基因连接 3）可不依赖于染色体进行独立复制 4）具有有别于宿主的选择性标记 5）可通过特定方法导入某些宿主细胞 功能不同 4、质粒作为载体 1.插入序列（insertion sequence,IS） 是最小的转位因子，长度不超过2kb，不携带任何已知与插入功能无关的基因区域，往往是插入后与插入点附近的序列共同起作用，可能是原细胞正常代谢的调节开关之一。 2.转座子（transposon,Tn） 长度一般超过2kb，除携带与转位有关的基因外，还携带耐药性基因、抗金属基因、毒素基因及其他结构基因等。因此当Tn插入某一基因时，一方面可引起插入基因失活产生基因突变，另一方面可因带入耐药性基因而使细菌获得耐药性。转座子可能与细菌的多重耐药性有关。 转座子的特征 3.转座噬菌体或前噬菌体 是一些具有转座功能的溶原性噬菌体，当整合到细菌染色体上，能改变溶原性细菌的某些生物学性状，如白喉棒状杆菌、肉毒梭菌等的外毒素就是由转座噬菌体的有关基因所编码的。另外，转座噬菌体从细菌染色体分离脱落时，可能连带有细菌的DNA片段，故它还可能在遗传物质转移过程中起载体作用。 形态结构变异 3-6%食盐鼠疫杆菌────→多形态性(衰残型)。???????? 琼脂培养基 形态结构变异 青霉素、溶菌酶正常形态细菌──────→ L型变异 抗体或补体 (部分或完全失去胞壁) 毒力变异 β棒状噬菌体白喉棒状杆菌────→ 获得白喉毒素 1)碱基置换(base substitution)：点突变 ATG CAC CTT CTT ATA AAA ACC GAA TAA 甲硫 组 亮 亮 异亮 赖 苏 谷 ATG CAC CTC CTT ATA AAA ATC GAA TAA 甲硫 组 亮 亮 异亮 赖 异亮 谷 2)插入或缺失突变(deletion or insertion mutation) 突变的机理 普遍性转导 在噬菌体DNA装入外壳蛋白组成新的噬菌体时，在105～107次装配中会发生一次装配错误，误将细菌的DNA片段装入噬菌体的头部，成为一个转导噬菌体。 普遍性转导 局限性转导 特殊用途的载体 克隆载体 表达载体 拷贝数高 具有单（多）克隆位点 载体本身带有一个或多个选择标记 除具有克隆载体的一般特性以外，还具有一套表达元件： 启动子、SD序列、终止子 3.基因工程载体分类 A A T T C T T A A G G A A T T C T T A A EcoRI 酶切 转化 1、高温变性 2、低温复性 3、一定温度延伸 PCR 三、转座因子 存在于细菌染色体上，可作为独立单位在染色体上自由移动的DNA片断。转座因子有三种类型：插入序列（IS）、转座子（Tn）、及特殊噬菌体。 Transposase ABCDEFG GFEDCBA IS IS IS IS Resistance Gene(s) IS IS Re