《青霉素的生产工艺流程》-课件设计（公开）.pptVIP

产黄青霉：Penicillium chrosogenum 深层培养 菌丝形态 菌落：平坦或皱褶，圆形。?? 分生孢子：链状； 颜色 培养基 碳源青霉菌能利用多种糖，如：葡萄糖、乳糖。目前采用淀粉水解糖，糖化液进行流加。 氮源可采用玉米浆、花生饼粉、精制棉籽饼粉或麸皮粉等有机氮源，及氯化氨、硫酸氨、硝酸氨等无机氮源。 前体为生物合成含有苄基基团的青霉素G，需要在发酵中加入前体如苯乙酸或苯乙酰胺。由于它们对青霉素有一定毒性，故一次加入量不能大于0.1%，并采用多次加入方式。 无机盐包括硫、磷、钙、镁、钾（前少后多，氮源转为氨基酸）等盐类。铁离子对青霉素有毒害作用，应严格控制发酵液中铁含量在30ug/mL以下。 青霉素萃取方式 多级逆流萃取 * * * * * * 武汉轻工大学 青霉素的生产工艺 主讲人：张璐 团队人员：周聪、吴昊、张杰、李春晓 知识目标： 掌握发酵生产青霉素的条件控制，及青霉素提取与精制的控制点。 重点:掌握发酵生产青霉素的工艺流程 难点:青霉素提取与精制的控制点 什么是青霉素 青霉素 又被称为青霉素G、青霉素钠、苄青霉素钠、青霉素钾、苄青霉素钾等。青霉素是抗菌素的一种，能破坏细菌的细胞壁（革兰氏阳性菌）并在细菌细胞的繁殖期起杀菌作用的一类抗生素，是第一种能够治疗人类疾病的抗生素。青霉素是β-内酰胺类抗生素的典型代表。 青霉素结构 青霉素的理化性质 1、稳定性：固体青霉素盐的稳定性与其含水量和纯度有很大的关系； 2、溶解度：青霉素游离酸在水中溶解度很小，易溶于有机溶剂如醋酸乙酯、苯、氯仿、丙酮和乙醚中，而其钾盐、钠盐易溶于水和甲醇，可溶于乙醇； 3、降解反应：青霉素是很不稳定的化合物，遇酸碱或加热易分解而失去活性，并发生分子重排。 （a）最早发现的产生青霉素的 原始菌种是点青霉菌，生产能力 很低，不能满足工业生产要求， 所以被淘汰。现在主要采用的的 产黄青霉菌。 （b）为了提高产黄青霉的青霉素产量 使用的诱变剂如：二环氧丁烷、 甲磺酸乙酯、乙烯亚胺、亚硝酸、 X射线等。 菌种： 丝状菌 球状菌 黄孢子丝状菌 绿孢子丝状菌：发酵单位85000U/mL 绿孢子球状菌 白孢子球状菌：发酵单位高，对原材 料、设备要求高，提 炼收率低。 青霉素发酵工艺 1.发酵工艺流程 孢子制备 1、将沙土孢子先在用甘油、葡萄糖、蛋白胨组成的培养基进行斜面培养，经传代活化，得单菌落。2、再传斜面，培养7天，制得斜面孢子。3、再移植到优质小米或大米固体培养基上，25oC，相对湿度45%-50%，生长7天，大米表面长出明显小菌落时要再振摇均匀，使菌丝在大米表面能均匀生长，制得绿色小米孢子。注意：①每批孢子必需进行严格摇瓶试验，测定效价及检查杂菌情况。②斜面孢子和米孢子培养要注意湿度控制 种子罐培养工艺 一级种子发酵：发芽罐，孢子萌发，形成菌丝。 培养基：葡萄糖，玉米浆，碳酸钙，玉米油 消沫剂等； 接种量:200亿孢子/t培养基 空气流量: 1：3（通气量与发酵液体积比）（m3 / m3 ·min）； 搅拌转速:300-350r/min； 温度：27±1℃ ； 时间: 40h。 质量：菌丝浓度达40%，菌丝形态正常 二级种子罐：繁殖罐，大量繁殖。 培养基：葡萄糖、玉米浆、碳酸钙，玉米油，消沫剂等； 接种量：10％； 空气流量：1:1-1.5 （m3 / m3 ·min）； 搅拌转速：250-280r/min； pH：自然； 温度：25±1℃； 时间： 10-14h； 质量：菌丝浓度达40%，残糖1.0%以下，菌丝粗壮，III期（脂肪粒，积累贮藏物），无杂菌，效价在700u/ml左右。 生产罐培养工艺 三级罐：生产罐； 培养基： 花生饼粉，葡萄糖，尿素，硝酸铵， 硫代硫酸钠，苯乙酰胺，CaCO3, 玉米油, 硅油. 温度控制 适宜菌丝生长温度一般为27oC，分泌青霉素20℃ 20℃青霉素破坏少，周期很长。 变温控制，不同阶段不同温度。 生长阶段:较高温度，缩短生长时间；生产阶段适当降低温度，以利于青霉素合成。 前期控制26℃左右，后期降温控制22℃ pH控制 合成适宜pH6.4－6.6左右，避免超过7.0 直接加酸或碱：自动控制 流加葡萄糖：速度取决于pH变化快慢。 pH下降：补加CaCO3、通氨、尿素或提高通气量 pH上升：补加