滩羊卵母细胞体外成熟体系建立.doc

宁夏大学新华学院 毕业论文（设计） （ 2013 届） 题 目 滩羊卵母细胞体外成熟体系建立 专 业 生物技术 年 级 2009 学生学号 12009248152 滩羊卵母细胞体外成熟体系建立 摘要 在细胞核移植过程中，体细胞必须在卵母细胞内进行重编程以恢复其全能性，卵母细胞成熟度直接影响体细胞重编程，故卵母细胞体外成熟培养是体细胞核移植极其重要环节，而卵母细胞又受环境，培养液浓度，培养温度等影响。本实验通过探讨不同浓度的 FSH 和 LH 及 HMG影响滩羊卵母细胞体外成熟因素的研究，建立滩羊卵母细胞体外成熟体系，为滩羊核移植及以后的优良育种奠定基础。 关键词：卵母细胞;FSH:LH;HMG;体外成熟；滩羊 Reprogramming of somatic cell directly, so that oocytes in vitro maturation plays an extremely importomt role in nuclear transplantation of somatic cell. However ,oocytes are affected by environment, medium concentration, culture temperature and so on ; in the research we studied the effore of different density FSH and LH and mixture of FSH and LH, HMG density, on oocytes in vitro maturation in tan sheep and established a system of oocytes in vitro maturation in tan sheep, laying the foundation for advamced breeding and nuclear transplantation of tan sheep Keywords: vitro maturation; FSH ; LH ; HMG; tan sheep 目录 TOC \o 1-3 \u 前言 PAGEREF _Toc1004 1 1实验材料与方法 PAGEREF _Toc3418 4 1.1实验材料 PAGEREF _Toc24413 4 1.2 主要仪器和耗材 PAGEREF _Toc14750 4 1.2.1主要仪器 PAGEREF _Toc10351 4 1.2.2 试剂 PAGEREF _Toc22509 4 1.3试验方法 PAGEREF _Toc14226 5 1.3.1 卵丘-卵母细胞复合体（cumulus oocyte complexes, COCs）的收集： PAGEREF _Toc26737 5 1.3.2 卵丘-卵母细胞复合体的体外成熟培养： PAGEREF _Toc22492 5 1.3.3 卵母细胞体外成熟效果判断： PAGEREF _Toc28469 6 2.实验分析 PAGEREF _Toc30028 6 2.1 FSH和LH对滩羊卵母细胞体外成熟的影响 PAGEREF _Toc18390 6 2.2 HMG对卵母细胞体外成熟的影响 PAGEREF _Toc1597 8 3 讨论与分析 PAGEREF _Toc15273 10 4结论： PAGEREF _Toc20848 11 参考文献 PAGEREF _Toc5671 12 谢词 PAGEREF _Toc32079 13 前言 滩羊是我国独特的裘皮用绵羊品种，是国家二级保护品种，2001年被农业部 列入第一批畜禽品种保护名录。其所产二毛皮毛色洁白，光泽悦目，花称美观。滩羊羔羊肉脂肪分布均匀，肉质细嫩,腥味小，是“宁夏羊肉”的代表，已享誉全国。宁夏是滩羊的主产区，在保护滩羊种质资源特色的同时，对滩羊繁育性能的改良是宁夏滩羊产业发展的共性需求[1]。动物体细胞克隆技术为动物育种技术开辟了更广泛的途径，必将极大地提高动物育种的效率。也为我区动物育种产业的发展提过了技术支撑。 在体细胞核移植中体细胞必须在卵母细胞内进行重编程以恢复其全能性，而卵母细胞的成熟度则会直接影响体细胞的重编程。所以卵母细胞的体外成熟，作为体细胞核移植过程中的一个重要环节