elisa方法一学验证.pptVIP

乙肝表面抗原的ELISA法定量分析方法学验证 课程要求 掌握： ①乙肝表面抗原的ELISA法定量检测方法； ②ELISA法方法学评价的方法。 熟悉： ①定量检测的酶标仪操作要领； ②各种缓冲液的配制。 了解： ELISA检测中的影响因素和注意事项。 试验目的 进行乙肝表面抗原ELISA法定量分析的方法学验证。 试验材料 1 试剂盒 乙肝表面抗原ELISA法定量分析试剂盒，福州蓝图生物工程有限公司出品。 2 仪器及酶标板 酶标仪：Bio-Rad 680 ； 洗板机：Bio-Rad 1575； 超纯水系统：Millipore Elix ； 电热恒温培养箱(DNP-9052):上海精宏实验设备有限公司。 3 溶液配制 0.01M pH7.4的PBS缓冲液： 称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1L即可。 质控品： 用PBS缓冲液将标准品配制成6、3、1.5ng/ml三个质控品，每质控品1ml。 试验方法 1 标准曲线各浓度的配制 用PBS缓冲液将标准品配制成8、4、2、1、0.5、0.25、0.125、0.0625ng/ml。 2 测定方法 设计标准品、质控品及空白分配方案； 取出试剂盒中已包被酶标板，