生物化学本科课件蛋白质的结构与功能.pptxVIP

第五节;一、透析及超滤法可去除蛋白质溶液中的小分子化合物;二、丙酮沉淀、盐析及免疫沉淀是常用的蛋白质浓缩方法;免疫沉淀法：将某一纯化蛋白质免疫动物可获得抗该蛋白的特异抗体。利用特异抗体识别相应的抗原蛋白，并形成抗原抗体复合物的性质，可从蛋白质混合溶液中分离获得抗原蛋白。 ;三、利用荷电性质可电泳分离蛋白质;SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，常用于蛋白质分子量的测定。 等电聚焦电泳，通过蛋白质等电点的差异而分离蛋白质的电泳方法。 双向凝胶电泳是蛋白质组学研究的重要技术。;四、应用相分配或亲和原理可将蛋白质进行层析分离;离子交换层析：利用各蛋白质的电荷量及性质不同进行分离。 凝胶过滤(gel filtration)又称分子筛层析，利用各蛋白质分子大小不同分离。; 牛牛文库文档分享; 牛牛文库文档分享;五、利用蛋白质颗粒沉降行为???同可进行超速离心分离;因为沉降系数S大体上和分子量成正比关系，故可应用超速离心法测定蛋白质分子量，但对分子形状的高度不对称的大多数纤维状蛋白质不适用。;六、应用化学或反向遗传学方法可分析多肽链的氨基酸序列;通过核酸来推演蛋白质中的氨基酸序列;离子交换层析分析蛋白质的氨基酸组分 ;七、应用物理学、生物信息学原理可进行蛋白质空间结构测定;三级结构测定 X射线衍射法(X-ray diffraction)和核磁共振技术(nuclear magnetic resonance