基因芯片技术检测3种食源性致病微生物方法建立.PDFVIP

微生物学通报 FEB 20, 2009, 36(2): 285~291 Microbiology © 2009 by Institute of Microbiology, CAS tongbao@ 生物实验室 基因芯片技术检测 3 种食源性致病 微生物方法的建立 1 1* 1 2 2 2 2 陈 昱 潘迎捷 赵 勇 金维荣 秦红友 徐晓晶 唐明未 (1. 200090) (2. 201203) 摘 要: 建立一种运用多重PCR 和基因芯片技术检测和鉴定志贺氏菌、沙门氏菌、大肠杆菌O157 的方法, 为 3 种食源性致病菌的快速检测和鉴定提供了准确、快速、灵敏的方法。分别选取编码 志贺氏菌侵袭性质粒抗原H 基因(ipaH) 、沙门氏菌肠毒素(stn)基因和致泻性大肠杆菌O157 志贺样 毒素(slt)基因设计引物和探针, 进行三重 PCR 扩增, 产物与含特异性探针的芯片杂交。对 7 种细 菌共26 株菌进行芯片检测, 仅 3 种菌得到阳性扩增结果, 证明此方法具有很高的特异性。3 种致 病菌基因组DNA 和细菌纯培养物的检测灵敏度约为8 pg。对模拟食品样品进行直接检测, 结果与 常规细菌学培养结果一致, 检测限为 50 CFU/mL。结果表明：所建立的基因芯片检测方法特异性 好, 灵敏度高, 为食源性致病菌的检测提供了理想手段, 有良好的应用前景。 关键词: 基因芯片, 多重PCR, 微生物, 检测 Detection of Three Foodborne Pathogenic Microorganisms by DNA Microarray CHEN Yu1 PAN Ying-Jie1* ZHAO Yong1 JIN Wei-Rong2 QIN Hong-You2 XU Xiao-Jing2 TANG Ming-Wei2 (1. College of Food Science and Technology, Shanghai Ocean University, Shanghai 200090, China) (2. Shanghai Biochip Co. Ltd, Shanghai 201203, China) Abstract: A rapid, sensitive and specific method of DNA microarray combined with multiplex PCR that al- low the simultaneous detection and identification of Shigella dysenteriae, Salmonella spp. and E. coli O157. The invasion-associated plasmid antigen H of S. dysenteriae(ipaH), Salmonella spp. enterotoxin gene(stn) and Escher