《2,4-二肖基氟苯柱前衍生高效液相色谱法测定18种氨基酸》-毕业论文.doc

PAGE PAGE 毕 业 论 文 (设计 ) 课题名称： 2,4-二硝基氟苯柱前衍生 HPLC法测定18种氨基酸 学 院： 药学院 专 业： 制药工程 班 级： 一 班 指导教师: 教授 学生姓名： 学 号： 佳木斯大学教务处 2,4-二硝基氟苯柱前衍生高效液相色谱法测定18种氨基酸 摘要：目的 建立2,4-二硝基氟苯柱前衍生高效液相色谱法测定18种氨基酸的分析方法。方法 以ZORBAX Eclipse XDB-C18 （4.6mm×150mm I.D.5-micron）为色谱柱，2,4-二硝基氟苯为衍生化试剂，梯度洗脱。流动相A：5 mmol/L乙酸钠缓冲溶液（pH=6.5，含1%N,N-二甲基甲酰胺），流动相B：乙腈/水（体积比为1比1），流动相C：甲醇，流动相D：水。结果 所测氨基酸组分的浓度在9.8mg/L -162.2mg/L范围内与峰面积之间具有良好的线性关系。测定结果的相对标准偏差为0.269%-7.97%。结论 建立了13种氨基酸高效液相色谱谱图，各种氨基酸较好的分离。 关键词：高效液相色谱法；柱前衍生；2,4-二硝基氟苯；氨基酸  Determination OF 18 Kinds OF Amino Acids BY HPLC With Precolumn 2,4-Dinttrofluorobenzene Derivatization Abstract: Objective Establish 18 kinds of amino acid high performance liquid chromatographic spectra. Methods Chromatographic conditions include using a ZORBAX Eclipse XDB-C18 column(4.6mm×150mm.i.d.5-Micron),the separation is performed with gradient elution,with2,4-dinitrofluorobenzene(DNFB),the mobile phase A is 5mmol/Lsoium acetate buffer(pH=6.5 containing 1%N,N-dimethylformamide),the mobile phase B is acetonitrile-water(volume ratio being 1:1),the mobile phase C is methanol ,the mobile phase D is water Results There is a good linear relationship between the peak area and the concentration of the amino acids in the range of 9.8mg/L -162.2mg/L and the RSD is 0.269%-7.97%.Conclusions Established 13 kinds of amino acid high performance liquid chromatographic spectra and all kinds of amino acid get better separation. Keywords: high performance liquid chromatographic;pre-column derivatization;2,4-dinitro fluorobenzene;amino acid. 目 录 TOC \o 1-3 \h \z \u HYPERLINK \l _Toc232303480 摘 要 I HYPERLINK \l _Toc232303481 Abstract Ⅱ HYPERLINK \l _Toc232303482 前 言 5 HYPERLINK \l _Toc232303483 1 仪器、材料和试剂 6 HYPERLINK \l _Toc232303484 1.1 实验仪器 6 HYPERLINK \l _Toc232303485 1.2 实验材料和试剂 6 HYPERLINK \l _Toc232303493 1.2.1 氨基酸标准品 6