第九章——生物技术与人类健康(2).pptVIP

延安大学教学课件——生物技术概论 生物及技术与人类健康 一、生物技术与疫苗 二、生物技术与疾病诊断 三、生物技术与生物制药 四、生物技术与生物疗法 问题提出 传统： 一是根据临床症状判断，感染者发病 二是先对病原物质进行分离培养 检测 现代生物技术——发病前或尽可能早 生物技术与疫苗 疫苗：是指为了预防、控制传染病的发生、流行，用于人体预防接种的疫苗类预防性生物制品。 疾病预防疫苗、诊断用单克隆抗体 基因探针、治疗用生物药品 生物技术与疫苗 一、病毒性疫苗 肝炎病毒疫苗 艾滋病病毒疫苗 小儿麻痹疫苗 基因工程多价疫苗 生物技术与疫苗 二、细菌性疫苗 霍乱疫苗 麻风杆菌疫苗 幽门螺杆菌疫苗 生物技术与疫苗 三、寄生虫病疫苗 疟原虫疫苗 血吸虫疫苗 生物技术与疫苗 四、DNA疫苗 将一种抗原基因重组到真核表达载体，直接或经包装注入体内表达出相应抗原，诱导机体产生免疫应答。 生物技术与疫苗 五、避孕疫苗 精子避孕疫苗 激素类避孕疫苗 生物技术与疫苗 六、治疗性疫苗 1995年前医学界普遍认为，疫苗只作预防疾病用。随着免疫学研究的发展，人们发现了疫苗的新用途，即可以治疗一些难治性疾病。从此，疫苗兼有了预防与治疗双重作用，治疗性疫苗属于特异性主动免疫疗法。 二、生物技术与疾病诊断 1、酶联免疫吸附检测技术与单克隆抗体 1.1、ELISA 技术与单克隆抗体 1.2、基因工程抗原 1.3、多克隆抗体与单克隆抗体 2、DNA 诊断技术 PCR技术 二、生物技术与疾病诊断 1.1、酶联免疫吸附检测技术 1971年Engvall和Perlmann发表了酶联免疫吸附剂测定用于IgG定量测定的文章 使得1966年开始用于抗原定位的酶标抗体技术发展成液体标本中微量物质的测定方法。 二、生物技术与疾病诊断 基本原理 ①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。 ②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性，又保留酶的活性。 ③利用颜色来判断 二、生物技术与疾病诊断 ㈠间接法测抗体 间接法是检测抗体最常用的方法，其原理为利用酶标记的抗抗体以检测已与固相结合的受检抗体，故称为间接法。操作步骤如下： 二、生物技术与疾病诊断 （1）将特异性抗原与固相载体连接； （2）加稀释的受检血清； （3）加酶标抗抗体； （4）加底物显色； 本法只要更换不同的固相抗原，可以用一种酶标抗抗体检测各种与抗原相应的抗体。 二、生物技术与疾病诊断 ㈡测定抗原的双抗体夹心法 双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法，操作步骤如下： 二、生物技术与疾病诊断 （1）将特异性抗体与固相载体连接； （2）加受检标本； （3）加酶标抗体； （4）加底物； 根据同样原理，将大分子抗原分别制备固相抗原和酶标抗原结合物，即可用双抗原夹心法测定标本中的抗体。 二、生物技术与疾病诊断 小结Ⅰ： ELISA 检验必须首先制备大量的抗原体 一：体外培养病原体，再体收集，处理。 二：不能进行体外培养的病原体，从受感染的动物或病人的组织分离收集，再处理 首先，抗原生产过程本身就有很大的危险 其次，产品的 质量难以控制，难以标准化 再次，生产费用高 二、生物技术与疾病诊断 小结Ⅱ： EUSA技术有时还必须制备抗体，用于检测抗原 用制备的抗原直接免疫动物 缺点：一个抗原往往会有多个抗原决定簇 二、生物技术与疾病诊断 1.2、基因工程抗原 基因工程抗体是以基因工程技术等高薪生物技术为平台，制备的生物药物总称 。 嵌合抗体、人源化抗体、完全人源抗体、单链抗体、双特异性抗体、细胞内抗体等 二、生物技术与疾病诊断 1.3、多克隆抗体与单克隆抗体 多克隆抗体 利用多克隆抗体进行疾病的诊断，至少有几方面的缺点： ①特异性较低； ②产品质量难于控制； ③生产过程费时、步骤多、成本高 二、生物技术与疾病诊断 1.3、多克隆抗体与单克隆抗体 单克隆抗体 由一种克隆产生的特异性抗体叫做单克隆抗体。单克隆抗体能目标明确地与单一的特异抗原决定簇结合 来源：利用细胞融合技术，在体外大量培养融合细胞，由融合细胞产生抗体 二、生物技术与疾病诊断 1.3、多克隆抗体与单克隆抗体 单克隆抗体应用 (1)鉴定微生物病原体 (2)确定激素水平 (3)检测肿瘤相关蛋白质 (4)检验血液中的药物含量 (5)肿瘤治疗 (6)其他领域的应用 二、生物技术与疾病诊断 2、DNA 诊断技术 DNA探针杂交技术 PCR 技术——聚合酶链式反应 PCR—RFLP技术——限制性片段长度多态性 PCR—ASO 技术——等位基因寡核苷酸 PCR-ELISA 技术 PCR-SSCP 技术——DNA 单链构型多态性 PCR-DGGE 技术——变性梯度