《壳聚糖酶产生菌产酶条件的优化研究》-毕业论文.docVIP

毕业设计（论文）开题报告 理工类 题 目: 壳聚糖酶产生菌产酶条件优化研究 学 院： 海洋学院 专业班级： 生物工程 生工 学生姓名： 学 号： 指导教师： 赵玉巧（教授） 2012 年 3月 6 日 淮海工学院毕业设计（论文）开题报告 1.课题研究的意义，国内外研究现状、水平和发展趋势 1.课题的研究意义： 壳聚糖酶可以专一性地降解壳聚糖，生产壳寡糖。壳寡糖具有水溶性好、生物活性高、功能作用大、应用领域广、易被人体吸收等突出特点，因此被广泛地应用于医药卫生、保健食品、食品加工、化妆品、纺织、环保、农业、饲料、环保等领域。但物理降解和化学降解生产壳寡糖由于污染较大，效率低，收率低，逐渐被淘汰。利用专一性的壳聚糖酶来制备壳聚糖，由于反应条件温和，得率高，以及可以结合一些过程工程的技术，从而可实现经济的大规模壳聚糖的连续生产，以此成为最有前途的方法。 2.国内外研究现状、水平： 国外对壳聚糖酶的研究已深入到分子水平，侧重于研究不同来源的壳聚糖酶的晶体结构与催化作用机理，并与已知壳聚糖酶的核苷酸序列进行对比，分析同源性，寻找酶分子中发挥催化功能的少数几个必需氨基酸，探索它们在催化壳聚糖水解过程中的作用。国内对壳聚糖酶的研究日益增多，主要是从自然界中筛选产酶活性较高的微生物菌种，进行诱变选育，优化发酵工艺与酶解条件，以期获得产酶量较大的菌种和活性较高的壳聚糖酶；而酶的氨基酸序列测定、重组壳聚糖酶基因的异源表达等方面的研究则相对较少。 问题与展望 虽然壳聚糖酶已经得到了商业化的应用， 但是由于原始的菌株产壳聚糖酶能力仍然较低， 使得壳聚糖酶的来源有限， 生产成本较高， 这些均成为限制壳寡糖在应用中不可避免的问题。同时， 现在商品壳聚糖酶在热稳定性等方面还不能满足大规模降解壳聚糖工业化生产的需求。因此， 一方面须要继续寻找不同微生物来源的壳聚糖酶， 另一方面须要对现有的壳聚糖酶菌株进行改造，以及培养条件的优化，以期获得高产壳聚糖酶菌株。 淮海工学院毕业设计（论文）开题报告 2.课题的基本内容，可能遇到的困难，提出解决问题的方法和措施 (1) 课题的基本内容： ?调查并充分查阅资料 ?设计实验方案 ?活化菌种 = 4 \* GB3 \* MERGEFORMAT ④优化发酵培养基的碳、氮源以及碳氮比，提高壳聚糖酶产量 = 5 \* GB3 \* MERGEFORMAT ⑤研究不同接种量、装液量对壳聚糖酶产量的影响 = 6 \* GB3 \* MERGEFORMAT ⑥通过加入某些特殊添加物来提高壳聚糖酶产量 = 7 \* GB3 \* MERGEFORMAT ⑦研究不同温度、pH以及培养时间对壳聚糖酶产量的影响 (2) 可能遇到的困难： ①微生物操作技术不熟练 ② 拿到的菌可能不是单菌 ③ 该菌是否具有产酶活力 (3) 提出解决问题的方法和措施： ① 调查和搜集各方面资料，咨询老师，调整不同的培养基。 ② 确保无菌操作，实验前加强操作的练习。 ③ 挑选单菌，按步骤测定酶活 3.课题拟采用的研究手段（途径）和可行性分析 (1) 研究手段： ① DNS测还原糖 ② 生产性能实验测酶活 (2) 可行性分析： DNS测还原糖通过DNS显示剂与还原糖结合显色，测其OD值，显色与还原糖含量，OD成正比。 生产性能实验测酶活，通过测定酶活反应优化的结果。 淮海工学院毕业设计（论文）开题报告 指导教师意见（对课题的深度、广度及工作量的意见和对设计结果的预测） 指导教师（签名） 年 月 日 系审查意见： 系主任(签名)： 年 月 日  毕业设计(论文)外文资料翻译 学 院： 海洋学院 专业班级： 生物工程 生工081 学生姓名： 王米雪 学 号： 040822121 指导教师： 赵玉巧（教授） 外文出处： (外文) Carbohydrate Polymers 72 (2008) 513–520 附 件： 1.外文资料翻译译文； 2.外文原文 指导教师评语： 签名： 年 月 日  B