第13章 肾脏疾病生物化学检验.ppt

1. N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG）- 检测项目 N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG） 在近曲小管上皮细胞中含量较高。NAG分子量约为140kD，不能通过肾小球屏障，故尿中NAG主要来自肾近曲小管上皮细胞。此酶在尿中稳定，是反映肾小管实质细胞损害的指标 检测依据 肾小管疾病 如肾小管间质病变、先天性肾小管病变、急性肾衰等， 均可使尿NAG升高 肾小球病变 如肾小球肾炎、糖尿病肾炎等尿NAG活性也升高，且与 病变程度相关 临床意义 NAG是诊断肾脏早期损害的灵敏指标，方法简便，快速采样方便，无 创伤性 应用评价 1. N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG）- 检测方法 检测原理 荧光光度法：NAG催化4-甲基伞形酮-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷水解，生成产物4-甲基伞形酮（4-MU）。后者在碱性条件下变构，在364nm激发光照射下，发出448nm发射光，根据荧光强度，计算出酶活性 方法学评价 NAG的分析方法主要有荧光分光光度法、色原性底物法。荧光分光光度法可选用4-甲基伞形酮-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷作底物，灵敏度高，但需荧光分光光度计 参考区间 成人尿NAG为< 22 IU/g Cr 2.中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）- 检测项目 中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL） 在人体组织（包括肾脏、肺、胃和大肠）中低表达。但是在受损的上皮细胞中表达显著上升。在急性肾功能衰竭发生早期即可在血液和尿液中被检测出来 检测依据 NGAL增高常见于各种急性肾功能衰竭、儿童心脏手术急性肾衰竭以及有机磷中毒患者肾和药物性肾损伤，原发肾病综合征患者血清中水平远高于健康体检者。 临床意义 NGAL是众多肾小管损伤检测指标中最早出现的敏感特异的标志物，测定快捷方便，结果可靠 应用评价 2.中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）- 检测方法 检测原理 胶乳增强免疫比浊法检测原理为样本中NGAL与包被在乳胶颗粒上的抗人NGAL抗体结合产生浊度，其浊度与NGAL浓度呈一定比例关系 方法学评价 乳胶增强免疫比浊法可在自动生化分析仪上检测血、尿NGAL，正确度、灵敏度较高，可重复性及稳定性好，操作简单、快速 参考区间 正常人尿液NGAL<50μg/L 3. 溶菌酶 - 检测项目 溶菌酶自肾小球基底膜滤出，90%以上被肾小管重吸收，所以正常人尿液中很少或无溶菌酶 检测依据 各种白血病患者血清及尿中溶菌酶含量增高，肾脏疾患（肾炎、多囊肾、肾盂肾炎）时尿和血清中溶菌酶水平明显增高，矽肺病人亦见增高 临床意义 尿液溶菌酶检测有一定干扰因素，如尿中酶灭活物质、尿液pH值，尿蛋白含量可影响酶排泄及活力。但尿溶菌酶的测定仍是一种较简单、敏感、稳定的肾脏疾病检测方法 应用评价 3. 溶菌酶 - 检测方法 检测原理 常用方法有光电比浊法和琼脂平板，前者观察浊度变化，后者在混有溶壁微球菌的琼脂板上打孔，加入样本后一定时间检测溶菌圈直径。新发展的测定方法主要有免疫电泳法、放射免疫法、酶联免疫吸附法等 方法学评价 比浊法及琼脂平板法灵敏度较低，仅合适测定含量较高的样本，且重复性较差。酶联免疫吸附法等方法有较高的灵敏度，其检出低限可达0.5ng/ml 参考区间 血清 5～10mg/L 尿液 0～2mg/L 三、肾远端小管功能检查 远曲小管和集合管的主要功能 在抗利尿激素和醛固酮的作用下，参与机体尿 液浓缩稀释，以及对水、电解质及酸碱平衡等 的调节，维持机体内环境的稳定 1.血清肌酐（Crea）-检验项目 肌酐为肌肉中磷酸肌酸的代谢产物，严格控制饮食后，血浆内生肌酐浓度比较稳定。肌酐主要从肾小球滤过，仅少量由近端小管排泌，不被肾小管重吸收，其血浆浓度取决于肾脏排泄能力，一定程度上可反映肾小球滤过功能 检测依据 增高 各种肾病、肾功能衰竭、心肌炎、肌肉损伤等 减低 进行性肌肉萎缩、白血病、贫血、肝功能障碍及妊娠等 临床意义 在正常肾脏血流量的条件下，血肌酐值如升高至176～353μmol/L，提示中度至严重的肾损害 血肌酐测定对晚期肾脏疾病的临床意义较大 血肌酐比血尿素的灵敏度低，但血肌酐受饮食、运动、激素、蛋白质代谢等因素的影响较少，所以诊断特异性比血尿素高 在控制外源性肌酐来源、无剧烈运动等条件下，血肌酐浓度主要取决于GFR；虽然敏感性和特异性不是很高，但检测简便 应用评价 1.血清肌酐（Crea）-检验方法-Jaffé反应法（苦味酸法） 检测原理 血浆(清)标本经除蛋白处理后，肌酐与碱性苦味酸发生Jaffé反应