第三章第六节 重组体的筛选.wangjx资料.pptVIP

第三章第六节 重组体的筛选.wangjx资料.ppt

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第五节 重组体的筛选 重组体筛选的方法 大体可分为两种:核酸水平和蛋白质水平 核酸水平上主要是通过核酸杂交。蛋白质水平上主要是检测抗生素抗性、营养缺陷型、观察噬菌斑的形成、检测目标酶活性、目标蛋白的免疫特性和生物活性。 利用抗生素抗性基因筛选 ?-半乳糖苷酶法 电泳检测法 菌落杂交筛选法 免疫化学检测法 DNA序列检测 1)利用抗生素抗性筛选 抗生素抗性筛选和遗传互补 抗生素抗性和插入失活 插入失活 X-gal 结构 * * 2)?-半乳糖苷酶法(插入失活法) 蓝白斑筛选 3) 电泳检测法 凝胶电泳检测 加样孔 DNA Marker 空质粒 重组质粒 重组质粒酶切 重组质粒的PCR扩增片段 4) 菌落杂交筛选法

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