三章中药药物分析方法.ppt

第三章 中药药物分析方法 药物分析教研室 控制中药质量，对保证中医临床用药安全、合理、有效、可靠极为重要。而中药中有效成分含量的多少与其质量优劣有直接关系，另一方面，含有毒剧成分的中药，只有严格控制其毒剧成分的含量，才能确保临床用药的安全和有效。因此，中药成分的定量分析是中药质量标准研究的核心部分，亦是质量控制中最能有效考察中药材内在质量的项目，同时也是中药稳定性考察的依据。 第二节 化学分析法 重量分析法：挥发法、萃取法和沉淀法 酸碱滴定法 滴定分析法 沉淀滴定法 配位滴定法 氧化还原滴定法  二、定量分析 1. 单组份定量分析法的应用 （1）吸收系数法 根据Beer定律A=εcl，若l和吸光系数ε或 （2）工作曲线法 从标准品吸光度-浓度曲线求得样品溶液的浓度。 ??? （3）对照品对照法 C样=C标?A样/A标； C标?A样/（A标?C?样）=样品% C样和C标分别为样品浓度和标准品浓度 C?样为样品标示浓度。 （四）示例 例：B12样品25.0mg用水溶成1000ml后，盛于1cm洗手池，在361nm处测得吸光度A为0.507，则： 4.导数光谱法 （1）导数光谱的特点 零阶光谱的λmax处，对应于奇阶导数光谱（n=1、3、5……）的零点和偶阶导数（n=2、4……）的极值点（峰或谷），零阶导数的拐点波长，对应于奇阶导数光谱的极值点和偶阶导数光谱的零点。 导数光谱的极值数=n+1个，即随着导数阶次的增加，极值数增加，谱带变窄，变锐，分辨率提高，使重叠的谱带被分离，谱带的精细结构更明显、更突出，有利于物质的鉴别。 （2）定量依据 若某吸收服从Lambert-beer定律，A=ECL则根据 导数光谱的定义有： （n=1、2、3……） 式中L为光积长度，对于给定物质在一定波长处 为定值，令导数值为D，则 由此可见，在一定波长处，导数值D与被测组分 浓度C成线性关系，这是该法的定量依据。 （三）被测组分定量信息 ①零阶光谱的绘制。在同一坐标中绘制被测组分l，常用被测组分对照品溶液和干扰组分的吸收曲线，得零阶光谱曲线。 ②微分阶数（n） n越大，分辨越高，但信噪比降低，通常不超过4阶，一般由干扰组分吸收曲线形状而定。 ③导数光谱绘制 选择适当的波长间隔(△λ)绘制，为好。△λ愈大，△A亦增大，测定灵敏度增大，但分解降低，通常选样1～2nm。 ④测定方法 常用工作曲线法，可根据实际情况选择DhDp或Do作为信号参数。 （4）应用与示例 清宫冲剂中胆酸的二阶导数光谱测定法 （i）干扰情况的考察 胆酸对照液与样品的二阶导数光谱显示，在397nm，386nm波长处有相应的吸收峰和吸收谷。阴性样品二阶导数光谱呈近乎平直线条，见下左图。猪去氧胆酸的二阶导数光谱将360～420nm区间的吸收消除为二次无关吸收，不干扰样品中胆酸的含量测定如下中图。下右图表明，胆酸二阶导数光谱，其峰-谷振幅值D与浓度具有良好的线性关系，因此，可用397nm，386nm两波长的振幅D为定量参数，用峰-谷法进行测定。 (ⅱ)测定条件：零阶光谱扫描波长：190～550nm；二阶导数光谱扫描波长，360～420nm；Δλ=5nm。 (ⅲ)标准曲线 ：精密称定胆酸对照品约30mg，置100ml量瓶中，加入60％醋酸稀释至刻度，分别精密吸取0.1、0.2…1.0ml于15ml具塞刻度试管中，加60％醋酸至1.0ml，加入稀硫酸14．0ml，摇匀，70℃水浴中放置20分钟，取出静置20分钟后，用1.0ml 60％醋酸加14.0ml上述稀硫酸作空白，测二阶导数光谱。中间波长397nm，386nm，测出各峰-谷振幅值D，得回归方程： D= 57.3066C – 0.1547(r=1.000) (ⅳ)样品测定 　精密称取约2.5g样品粉末加50ml氯仿回流提取4小时，常压回收氯仿至干，用60％醋酸溶解，定容于10ml量瓶中，精密吸取1.0ml样品液于15ml具塞刻度试管中，按标准曲线项下操作，测峰-谷振幅值D，按回归方程计算样品中胆酸含量。 　本法平均回收率：102.9％，RSD＝0.6％。 （2）应用与示例 差示光谱法测定含牛黄的中成药中胆红素的含量 1）测定原理 胆红素具有高度共轭体系结构，在波长453nm处为最大吸收，在可见光照射下胆红素易氧化成蓝色产物，在453nm处吸收度显著降低