《GBT12390-1990-食物中硫胺素维生素的测定方法》.pdfVIP

GB 12390—1990 中华人民共和国国家标准 食物中硫胺素（维生素 B1 ）的 测定方法 Method for determination of thiamine (vitamin B ) 1 in foods GB/T 12390—1990 1 主题内容与适用范围 本标准规定了用荧光测定法测定食物中硫胺素含量的方法。 本标准适用于各类食物中硫胺素的测定，但不适用于有吸附硫胺素能力的 物质和含有影响噻嘧色素荧光物质的样品。 本方法的最小检出限为 0.05µg。 2 原理 硫胺素在碱性铁氰化钾溶液中被氧化成噻嘧色素，在紫外线下，噻嘧色素 发出荧光。在给定的条件下，以及没有其他荧光物质干扰时，此荧光之强度与 噻嘧色素量成正比，即与溶液中硫胺素量成正比。 如样品中含杂质过多，应经过离子交换剂处理，使硫胺素与杂质分离，然 后以所得溶液作测定。 3 试剂 3．1 正丁醇：优级纯或重蒸馏的分析纯。 3．2 无水硫酸钠：分析纯。 3．3 淀粉酶。 3．4 水：去离子水或蒸馏水。 3．5 0.1mol/L 盐酸：8.5mL 浓盐酸用水稀释至 1 000mL。 3．6 0.3mol/L 盐酸：25.5mL 浓盐酸用水稀释至 1 000mL。 3．7 2mol/L 乙酸钠溶液：164g 无水乙酸钠或 272g 含水乙酸钠溶于水中稀释 至 1 000mL。 3．8 25%氯化钾溶液：250g 氯化钾溶于水中稀释至 1 000mL。 3．9 25%酸性氯化钾溶液：8.5mL 浓盐酸用 25%氯化钾溶液稀释至 1 000mL。 3．10 15%氢氧化钠溶液：15g 氢氧化钠溶于水中稀释至 100mL。 3．11 1%铁氰化钾溶液：1g 铁氰化钾溶液溶于水中稀释至 100mL。放于棕色瓶 内保存。 3．12 碱性铁氰化钾溶液：取 4mL1%铁氰化钾溶液，用 15%氢氧化钠溶液稀释 至 60mL。用时现配，避光使用。 3．13 3%乙酸溶液：30mL 冰乙酸用水稀释至 1 000mL。 3．14 活性人造浮石：称取 100g 经 40 目筛的人造浮石，以 10 倍于其容积的 3%热乙酸搅洗 2 次，每次 10min；再用 5 倍于其容积的 25%热氯化钾搅洗 15min； 然后再用 3%热乙酸搅洗 10min；最后用热蒸馏水洗至没有氯离子。于蒸馏水中 中华人民共和国卫生部中华人民共和国卫生部 1990—03—191990—03—19 批准 199批准 1990—12—010—12—01 实施 实施 GB 12390—1990 保存。 3．15 硫胺素标准贮备液：准确称取 100mg经氯化钙干燥 24h 的硫胺素，溶于 0.01mol/L 盐酸中，并稀释至 1 000mL。此溶液每毫升相当 0.1mg 硫胺素。于冰 箱中避光可保存数月。 3．16 硫胺素标准中间液：将硫胺素标准贮备液用 0.01mol/L 盐酸稀释 10倍。 此溶液每毫升相当 10µg 硫胺素。于冰箱中避光可保存数月。 3．17 硫胺素标准使用液：将硫胺素标准中间液用水稀释 100 倍，此溶液每毫 升相当 0.1µg 硫胺素。用时现配。 3．18 0.04%溴甲酚绿溶液：称取 0.1g 溴甲酚绿，置于小研钵中，加入 1.4mL 0.1mol/L 氢氧化钠研磨片刻，再加入少许水继续研磨至完全溶解，用水稀释至 250mL。 4 仪器设备 4．1 实验室常用仪器设备。