第五章-基因的转录.ppt

3. hnRNA的剪接过程： ① snRNP与hnRNA结合成为剪接体。 ② 剪接体结构调整，U2和U6形成催化中心，发生转酯反应。 UpA GpU 外显子1 内含子 外显子2 pG-OH (ppG-OH, pppG-OH) U-OH GpU pGpA 第一次转酯反应 第二次转酯反应 G-OH UpU pGpA 剪接过程的二次转酯反应 鸡卵清蛋 白基因 hnRNA 首、尾修饰 hnRNA剪接 成熟的mRNA 鸡卵清蛋白基因及其转录、转录后修饰 ? RNA编辑作用说明，基因的编码序列经过转录后加工，是可有多用途分化的，因此也称为分化加工(differential RNA processing)。 4. mRNA的编辑（mRNA editing） 人类apo B基因 mRNA（14500个核苷酸） 肝 apo B100 （分子量为500 000） 肠道细胞 apo B48 （分子量为240 000） mRNA编辑 二、tRNA的转录后加工 主要有以下几种加工方式： 切断。 剪接。 3’-末端-CCA序列添加。 化学修饰。 tRNA前体 RNA pol Ⅲ TGGCNNAGTGC GGTTCGANNCC DNA tRNA前体的转录合成 tRNA前体的切断和剪接加工 tRNA3-末端-CCA序列的添加 tRNA的碱基修饰 （2）还原反应 如：U ? DHU （3）核苷内的转位反应 如：U ? ψ （4）脱氨反应 如：A ? I 如：A ? Am （1）甲基化 （1） （1） （3） （2） （4） 三、rRNA的转录后加工 rRNA前体的转录和剪接加工 四、核酶 具有催化活性的RNA称为核酶。 核酶(ribozyme) 四膜虫rRNA内含子的二级结构 四膜虫rRNA的剪接采用自身剪接方式 5′-端核苷酸序列 四膜虫前rRNA的自身剪接过程 最简单的核酶二级结构——锤头结构 (hammerhead structure) 底物部分 通常为60个核苷酸左右 同一分子上包括有催化部份和底物部份 催化部份和底物部份组成锤头结构 核酶研究的意义 核酶的发现，对中心法则作了重要补充； 核酶的发现是对传统酶学的挑战； 利用核酶的结构设计合成人工核酶 。 原核生物转录起始区的一致性序列 被RNA聚合酶辨认的区段就是位于转录起始点-35区的TTGACA序列。 RNA聚合酶与该区结合后，即滑动至-10区的TATAAT序列（Pribnow盒），并启动转录。 RNA聚合酶全酶在转录起始区的结合 ⑵ DNA局部双链解开。 ⑴ RNA聚合酶全酶(?2????)与模板结合。 ⑶ 在RNA聚合酶作用下发生第一次聚合反应，形成转录起始复合物。 RNApol (?2????) - DNA - pppGpN- OH 3? 转录起始复合物: 5?-pppG -OH + NTP ? 5?-pppGpN - OH 3? + ppi 2. 转录的起始过程： ?因子从全酶上脱离，余下的核心酶继续沿DNA链移动，按照碱基互补原则，不断聚合RNA。 1. ?亚基脱落，RNA–pol聚合酶核心酶变构，与模板结合松弛，沿着DNA模板前移； 2. 在核心酶作用下，NTP不断聚合，RNA链不断延长。 （二）转录延长 (NMP) n + NTP ?? (NMP) n+1 + PPi RNA转录的延长 转录空泡(transcription bubble)的形成 原核生物转录过程中的羽毛状现象 RNA转录合成的终止机制有两种： 1．依赖Rho因子的转录终止： 由终止因子（?因子）识别特异的终止信号，并促使RNA的释放。 （三）转录终止 ATP 依赖 Rho因子的转录终止 模板DNA链在接近转录终止点处存在相连的富含GC和AT的区域，使RNA转录产物形成寡聚U及发夹形的二级结构，引起RNA聚合酶变构及移动停止，导致RNA转录的终止。 2．非依赖Rho的转录终止： 5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU... 3` 5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU... 3` RNA 5?TTGCAGCCTGACAAATCAGGCTGATGGCTGGTGACTTTTTAGTCACCAGCCTTTTT... 3? DNA UUUUU...… UUUU...… 5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU... 3` 茎环(stem-loop)/发夹(hairpin)结构 茎环结构使转录终止的机理 使R