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第 五 章 酶 生物催化剂(biocatalyst) 核酶(ribozyme)：具有高效、特异催化作用的核酸，主要参与RNA的剪接。 几个有关名词 底物(substrate, S)：酶作用的物质。 产物(product, P)：反应生成的物质。 酶促反应：酶催化的反应。 酶活性：酶催化化学反应的能力。 酶的分子组成 （一）酶的活性中心 活性中心内的必需基团 变构调节 　 当[S]＞＞[E]，反应速度与酶浓度成正比。 二、底物浓度对反应速度的影响 　　矩形双曲线 2. Km可近似表示酶对底物的亲和力；Km愈大，E与S亲合力愈小。 三、温度对反应速度的影响 双重影响 六、抑制剂对反应速度的影响 酶的抑制剂(inhibitor) 凡能使酶的催化活性下降而不引起酶蛋白变性的物质统称为酶的抑制剂。 (一) 不可逆性抑制作用 概念 抑制剂通常以共价键与酶活性中心的必需基团结合，使酶失活，不能用透析、超滤等方法予以除去。 　 　 （二） 可逆性抑制作用 概念 抑制剂以非共价键与酶或酶-底物复合物可逆性结合，使酶的活性降低或丧失；抑制剂可用透析、超滤等方法除去。 1.竞争性抑制作用 定义 抑制剂与底物的结构相似，能与底物竞争酶的活性中心，从而阻碍酶底物复合物的形成，使酶的活性降低。 竞争性抑制 2. 非竞争性抑制 　　抑制剂与酶活性中心外的必需基团结合，底物与抑制剂之间无竞争关系。　 非竞争性抑制 四、修饰酶 酶分子上的某些基团在另一种酶的催化下发生共价变化，从而改变酶的活性，称为化学修饰调节。这类酶称修饰酶。 常见类型 磷酸化与脱磷酸化（最常见） 乙酰化和脱乙酰化 甲基化和脱甲基化 腺苷化和脱腺苷化 －SH与－S－S互变 举例 如图所示：反应速度随时间的延长而逐渐降低，只有在反应刚开始的短时间内，时间与产物生成量成正比，即时间进程曲线为直线时的反应速度 产物 时间 初速度 第四节 影响酶促反应速度的因素 酶促反应速度常以反应体系中单位时间内底物的消耗量或产物的生成量来表示。 0 V [E] 一、酶浓度[E] ※1913年Michaelis和Menten提出反应速度与底物浓度关系的数学方程式，即米－曼氏方程式，简称米氏方程式(Michaelis equation)。 Ｖ Vmax[S] Km + [S] ＝ （一）米－曼氏方程式 米－曼氏方程式推导基于两个假设： ①反应刚刚开始，产物的生成量极少，逆反应可不予考虑。 ②［S］超过［E］，［S］的变化可忽略不计。 当v=Vmax/2时 Km＝[S] 1.Km值等于酶促反应速度为最大反应速度一半时的底物浓度，单位是mol/L。 2 ＝ Km + [S] Vmax Vmax[S] Vmax V [S] Km Vmax/2 （二）Km与Vmax的意义 3.　Km是酶的特征性常数之一；只与酶结构和催化底物有关，与酶浓度无关。 最适温度 (optimum temperature)：酶促反应速度最快时的环境温度。 * 低温的应用 酶 活 性 0.5 1.0 2.0 1.5 0 10 20 30 40 50 60 温度 oC 四、pH对反应速度的影响 最适pH (optimum pH)： 酶催化活性最大时的环境pH。 0 酶 活 性 pH 胃蛋白酶 淀粉酶 胆碱酯酶 2 4 6 8 10 凡是能使酶活性增加的物质都称为激活剂。其作用是： 1.作为酶活性中心成分。 2.作为酶与底物结合的桥梁。将E与S鳌合。 3.稳定酶蛋白的构象所必需。 五、激活剂（activator） 区别于酶的变性 　　抑制剂对酶有一定选择性，而变性的因素对酶没有选择性 抑制作用的类型 不可逆性抑制(irreversible nhibition) 可逆性抑制(reversible inhibition)： 竞争性抑制 (competitive inhibition) 非竞争性抑制 (non-competitive nhibition) 反竞争性抑制 (uncompetitive inhibition) * 举例 有机磷化合物 ?? 羟基酶 解毒 -- -- 解磷定(PAM) 重金属离子及砷化合物 ?? 巯基酶 解毒 -- --二巯基丙醇(BAL) 有机磷化合物对羟基酶的抑制 路易士气 失活的酶 巯基酶 失活的酶 酸 BAL 巯基酶 BAL与砷剂结合物 竞争性抑制 非竞争性抑制 反竞争性抑制 * 类型 1.竞争性抑制作用 * 特点 抑制程