第八章 吸光光度法..pptVIP

第八章 吸光光度法 　　　基于物质对光的选择性吸收而建立的分析方法称为吸光光度法。包括比色法、可见及紫外分光光度法等。本章主要讨论可见光区的吸光光度法。利用可见光进行吸光光度法分析时，通常将被测组分通过化学反应转变成有色化合物，然后进行吸光度的测量。例如：测量钢样中Mn的含量，在酸性溶液中将Mn?氧化为MnO4-，然后进行吸光度的测量。 （一）灵敏度高 　　吸光光度法常用于测定试样中1－0.001%的微量组分。 对固体试样一般可测至10-4%。 （二）分析微量组分的准确度高 　　例如：含铁量为0.001%的试样，如果用滴定法测定，称 量1g试样，仅含铁0.01mg，无法用滴定分析法测定。如果用 显色剂1，10-邻二氮杂菲与铁生成橙红色的1，10-邻二氮杂 菲亚铁配合物就可用吸光光度法来测定。 §8-1 吸光光度法基本原理 一、物质对光的选择吸收 　　当光束照射到物质上时，光与物质发生相互作用，产生 了反射、散射、吸收或透射（p238, 图9-1）。若被照射的是 均匀的溶液，则光在溶液中的散射损失可以忽略。 　　物质吸收了光子的能量由基态跃迁到较高能态（激发态），这个过程叫做物质对光的吸收。 　　 由P239, 图9-3 可以看出：不同浓度的1，10-邻二氮杂菲亚铁溶液对不同波长的光吸收情况不同，其最大吸收波长位于510nm，即吸收的是绿光，呈现的是相应的互补色橙红色。当溶液浓度增大时，吸光度增大，但最大吸收波长λmax不变。在吸光光度法分析中，一般都在最大吸收波长处测量吸光度。 　　当一束平行单色光通过液层厚度为b、吸光物质的浓度为c的单一均匀的，非散射的有色溶液时, 溶液的吸光度与溶液浓度和液层厚度成正比。 　　在分光光度分析的实际工作中，不能直接取1mol/L这样高的浓度测定摩尔吸光系数κ值，而是在适宜的低浓度下测量吸光度A，然后通过计算求出κ值。 　　吸光度具有加合性，即体系总的吸光度等于各组份吸光度之和（设各吸光物质之间没有互相作用）。 偏离朗伯-比耳定律的因素可分为物理因素和化学因素两大类。 （二）化学因素 　(1) 粒子间相互作用 　　　朗伯-比耳定律的基本假设，除要求入射光是单色光 外，还假设吸收粒子之间无相互作用，即彼此是独立的，因 此稀溶液能很好地符合定律。随浓度增大，粒子之间的相互 作用增大，因此高浓度时吸光度与浓度间的关系就偏离线性 关系。 § 8-2 目视比色法及光度计的基本部件 一、目视比色法 　 用眼睛比较溶液颜色的深浅以测定物质含量的方法称为 目视比色法。常用的目视比色法是标准系列法。这种方法就 是使用一套由同种材料制成的、大小形状相同的平底玻璃管 （称为比色管），于管中分别加入一系列不同量的标准溶液 和待测液，在实验条件相同的情况下，再加入等量的显色 剂，稀释至一定刻度，然后从管口垂直向下观察，比较待测 液与标准溶液颜色深浅。若待测液与某一标准溶液颜色深度 一致，则说明两者浓度相等，若待测液介于两标准溶液之 间，则取两标准液平均值为待测液浓度。 　目视法的主要缺点是准确度不高，受主观观察影响较大。 对于颜色不稳定的有色溶液，标准系列不能久存，需在测定 时配制，比较麻烦。但其设备简单，操作简便，对于准确度 要求不高的常规分析很方便实用。 光度计的基本组成：光源→单色器→吸收池→检测器 吸收池：亦称比色皿，用于盛吸收试液，能透过所需光谱范 围的光线，可见区测定可使用玻璃比色皿。紫外区测定须选 用石英比色皿。 §8-3 显色反应和显色条件选择 一、显色反应和显色剂 　　在光度分析中，将试样中被测组分转变成有色化合物的 化学反应叫显色反应。显色反应可分为两大类，即配位反应和 氧化还原反应，而配位反应是最主要的显色反应。与被测组分 生成有色物质的试剂称为显色剂。同一被测组分常可与若干种 显色剂反应，生成多种有机化合物。 选择显色反应的一般标准： （三）显色剂在测定波长处无明显吸收 　　这样可使试剂空白一般较小。 （一）显色剂的用量 （二）溶液的酸度 　　　　　溶液酸度对显色反应的影响可从金属离子、显色剂及有色配合物三方面考虑。 　　大部分高价金属离子都易水解，显然，金属离子的水解，对于显色反应的进行是不利的，故溶液的酸度不能太低。显色剂多是有机弱酸，溶液的酸度影响着显色剂的离解，并影响显色反应的完全程度。此外，许多显色剂本身就是酸碱指示剂，溶液的酸度对显色剂本身的颜色会产生改变。溶液的酸度对有色配合物的组成及稳定性也有影响。因此，某一显色反应最适宜的酸度可通过实验来确定。固定待测组分及显色剂浓度，改变溶液pH，测定其吸光度，做吸光度-pH关系曲线，曲线平坦部分对应的pH为适宜的酸度范围。 （三）显色温度 　　　合适的显色温度也必须通过实验确定，做A-T曲