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本章主要内容 第一节 直接参数的检测与控制 第二节 生物传感器 第三节 生产过程中的染菌及其控制 生化过程参数的分类 反映生化过程变化的参数分为两大类:一类是 可以直接采用特定的传感器检测的参数称为直接 参数,包括各种反映物理环境和化学环境变化的 参数:如温度、压力、流量、搅拌功率、转速、 泡沫、黏度、浊度、pH、离子强度、溶解氧和基 质浓度等。另一类是综合参数,包括细胞生长速 率、产物合成速率、呼吸商等。 第一节 直接参数的检测和控制 一. 温度检测和控制 严格保持菌种的生长繁殖和生物合成所需的最适温度,对稳定发酵过程,缩短周期,提高产量,具有重要意义。通常可以采用水银温度计、热电阻监测系统中的温度。普遍使用的热电阻有铂电阻和铜电阻。 发酵热的测定 (1)通过测量一定时间内冷却水的流量和冷却水的进出。 Q发酵=GC(T2-T1)/V Q发酵-----------发酵热;C-------冷却水的比热 G-----------冷却水的流量;T1T2------进出口冷却水的温度; V----------发酵液的体积 (4)测定微生物生长代谢中的耗氧量。 --------发酵过程中生成的发酵热数量; ---------基质完全氧化需氧量与菌体和产物完全氧化需氧量之差,即微生物在生长和代谢过程中所消耗的氧; 二. pH的检测和控制 pH值可用耐灭菌的玻璃电极和银-汞参比电极以及pH 测量仪表的检测系统检测,可连续指示罐内酸碱变化。 微生物反应过程中pH的变化具有一定规律。 ①在微生物细胞的生长阶段,由于所用的微生物菌种不同,相对于接种后的起始pH值有上升或下降趋势 引起反应液pH 值下降的主要原因有: 1.培养基中的碳/氮比例不当,碳源过多,特别是葡萄糖过量或者中间补糖过多或溶解氧不足,致使糖等物质氧化不完全,培养液中有机酸会大量积累,从而使pH值下降 2. 消泡油加得过多; 3. 微生物生理性物质的存在,使pH值下降。 反应液中pH值的控制方法 1.调节培养基中的原始pH值,或加入缓冲溶液制成缓冲能力强、pH值变化不大的培养基。 2. 可在反应过程中加入弱酸或弱碱进行pH值的调节,进而合理地控制发酵条件,也可通过调整通风量来控制pH值。 3. 进行补料,既调节了培养液的pH值,又可补充营养,增加培养液的浓度和减少阻遏作用,进一步提高产率。 三. 泡沫的影响和控制 太多的泡沫给反应带来不利的影响 1. 使反应器的装填系数减少; 2. 造成大量逃液,导致产物的损失; 3. 泡沫“顶罐”有可能使培养基从搅拌的轴封渗出,增加了染菌的机会。 微生物反应过程产生泡沫的原因 1. 由外界引进的气流被机械地分散形成 2. 反应过程产生的气体聚结生成的泡沫 培养基的物理化学性质对泡沫形成的表面现象起 决定作用,此外,培养基的温度、酸碱度、浓度 等对过程的泡沫也有一定的影响。培养基中的蛋 白质含量越多,反应液的黏度也越大,越容易起 泡,泡沫多而且持久稳定。 机械消泡 靠机械强烈振动和压力的变化,促使细胞破裂,或借助机械力将排出气体中的液体加以分离回收,从而达到消泡的作用。机械消泡的优点是不需在发酵液中加入其他物质,减少了由于加入消泡剂所引起的染菌机会和对后续分离的影响。但是机械效果不如化学消泡迅速、可靠、不能根本上消除引起稳定泡沫的因素,而且它还需要一定的设备和消耗一定的动力。 液位电极控制消泡剂的流加 液位电极是根据空气与带有发酵液的泡沫 导电率不同的原理制造。 采用双位式的控制方法,当反应物液面达 到一定的高度时,自动打开消泡剂的阀门,当液面降回到正常时,自动关闭消泡剂的阀门。 第二节 生物传感器 传感器(电极或探头):能感受规定的被测量并 按照一定的规律将其转换成可用信号的器件或装 置,它通常由敏感元件、转化元件及相应的机械 结构和线路组成。 生物传感器:是利用酶、抗体、微生物等作为敏 感材料,将所感受的生物体信息转换成电信号进 行检测的传感器。 生物传感器的应用领域 临床检测:葡萄糖85%,乳酸盐及其他4%, 研究4%。 药物:3% 环境:2% 食品:2% 机器人、国防及其他:1% 生物传感器的结构和原理 生物传感器的结构一般是在基础传感器(电化学装置)上再耦合一个生物敏感膜(称为感受器或敏感元件)。生物敏感膜紧贴在探头表面上,再用一种半渗透膜与被测溶液隔开。当待测溶液中的成分透过半透膜有选择地附着于敏感物质时,形成复合体,随之进行生化和电化学反应,产生普通电化学装置能感知的O2、H2、 NH4+、CO2等,并通过电化学装置转换为电信号 生物传感器的特点 1)对被检测物质具有极好的选择性,噪音低。 2)操作简单,需用样品少,能直接完成测定。 3)经固定化处
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