第10章 吸光光度法(2013-3)..pptVIP

第10章 吸光光度法 Absorption Photometry 2. 显色反应条件(reaction condition) 溶液的酸度 影响显色剂的平衡浓度和颜色 影响配合物的组成和颜色 影响被测金属离子的存在状态 显色剂用量 显色反应进行完全，不引起副作用 温度 通过实验找出适宜的温度范围 时间 在颜色稳定的时间范围内进行比色测定 溶剂 有机溶剂会降低有色物的离解度，从而提高显色反应的灵敏度 3. 共存离子的影响及消除方法 (a) 控制酸度，使干扰离子不显色 (b) 加入掩蔽剂 如用SCN-测定Co2+时， Fe3+有干扰，加 入 F- ， Fe3+ + 6F- = FeF63- ， Fe3+被掩蔽。 (c) 改变干扰离子价态 用铬天菁S测Al3+时， Fe3+有干扰，加入Vc使 Fe3+ → Fe2+ 。 (d) 分离干扰离子 用萃取、沉淀、电解、离子交换等方法。 五、测定条件选择selection of measurement conditions 选择原则：有效消除被测溶液中非被测物产生的吸收和其他影响因素 选择方法： 1）试液及显色剂均无色 可用蒸馏水作参比溶液 2）显色剂有颜色 不加试样溶液的试剂空白作参比。 3）显色剂为无色，试液中共存离子有色 可用不加显色剂的被测试液作参比溶液 ；改变加入试剂的顺序，使被测组分不发生显色反应，以此溶液作为参比。如：KIO4 氧化显色法测定含钴试样中的锰。 4）显色剂和试液均有颜色 加入适当掩蔽剂掩蔽被测组分，使之不再与显色剂作用，而显色剂及其他试剂均按试液测定方法加入。如：以铬天青S为显色剂测定含干扰离子Ni2+、Cr3+、Co 2+ 中的Al3+，加NH4F掩蔽Al3+。 3. 吸光度大小的控制 原则：尽量减少仪器测量误差 控制试样量或稀释程度 选择不同厚度的比色皿 A为0.2—0.8误差较小 六、测定方法及应用measurement methods and application 1. 测定方法(quantitive methods) 校准曲线法(working curve/ calibration curve) Attention 校准曲线有时不通过原点 校准曲线弯曲 标准加入法 A=εb(cx + c ) A=0, cx=-c 解方程组法 在不同波长测定A值 根据L－B关系式例方程求解 适合多组分测定 示差法(differential method)——高含量组分测定 用浓度稍低的标准溶液 cr做参比，调节T%为100（A = 0），来测定试样的浓度cx 。 Ar = εbcr Ax = ε bcx △A =Ax – Ar = ε b（cx－cr） = ε b△c 标尺放大倍数n Remarks 示差法的测量误差 两个溶液的浓度差?c（即cx-cR），如测量误差为x％，所得结果为cx±(cx-cR) × x% 导数光度分析法(derivative spectrophotometry) 在双波长分光光度计上，如果使用的两个波长λ1和λ2很接近进行同时扫描，并保持两波长差?λ（或dλ）不变，便可获得一阶导数光谱 即吸光度随波长变化率对波长的曲线。对n阶导数而言，导数光谱即 －λ曲线 原理 特点 能够分辨两个或两个以上严重重叠的吸收峰。 能够分辨吸光度随波长急剧上升处所掩盖的弱吸收峰。 催化光度法(catalytic photometry) 催化反应速率在一定范围内与催化剂浓度成比例关系，以光度法检测催化反应速率。 A + B cat. C + D 产物有色 若A, B浓度大，基本不变化，则 v = dcD/dt = kccat 积分得：cD= kccatt =At/εDb = k’A A = Kccatt 定量：固定时间，测定不同ccat时的A，作校准曲线 若反应物A有色，检测A的变化，B大量过量时， A + B cat. C + D 反应物有色 则有 lg(A0/At) = Kccatt 目视比色法 眼睛观察、比较溶液颜色深度以确定物质含量 标准1 2 3