枯草芽抱杆菌作为外源基因表达系统的研究进展.PDFVIP

浙江农业学报ActaAgriculturaeZhejiangensis17(4):234一238,2005 枯草芽抱杆菌作为外源基因表达系统的研究进展 沈卫锋，牛宝龙，翁宏A，何丽华，孟智启 (浙江省农业科学院蚕桑研究所，浙江杭州310021) 摘 要:枯草芽抱杆菌是目前研究较为详尽的外源基因表达宿主，但由于受自身分泌蛋白酶多、构建的表达 质粒不太稳定等因素影响，其应用受到一定的限制。文章综述了枯草芽抱杆菌基因组的特征、蛋白的分泌机 制、重组表达质粒不稳定的原因，指出了枯草芽抱杆菌作为外源蛋白表达系统的瓶颈及今后的研究重点。 关键词:枯草芽抱杆菌;基因组;表达系统 中图分类号二Q343.1 文献标识码:A 文章编号:1004一1524(2005)04一0234一05 Thestu山eson subtilisasanexpressionsystemofforeigngenes SHENWei-feng,NIUBao-long,WENGHong-biao,HELi-hua,MENGZhi-qi (SericulturalResearchInstitute，ZhejiangAcademyofAgriculturalSciences，Hangzhou310021，China) Abstract:Recently,Bacillussubtilisasavaluablehostforheterologousgeneexpressionhasbeendeveloped.Itsapplica- tionarerestricted场secretingavarietyofself-proteinsandunstablerecombinationexpressionplasmids.Thisarticlehasre- countedthefeatureofgenommc,proteinsecretionmechanisms,reasonsoftherecombinationexpressionplasmidsunstabiliz- ingandpointoutthebottleneckasaexpressionsystem,alongwiththeresearchorientation. Keywords:Bacillussubtilis;genomic;expressionsystem 枯草芽抱杆菌是一类好氧型、内生抗逆抱子 的杆状细菌，广泛存在于土壤、湖泊、海洋、动植 1基因组研究 物的体表，自身没有致病性，只具有单层细胞外 膜，能直接将许多蛋白分泌到培养基中。在营养 枯草芽抱杆菌的遗传物质是双链环状 缺乏的条件下，枯草芽抱杆菌停止生长，但同时 DNA，全基因组有4214810个碱基，G+C含量 加快代谢作用，产生多种大分子的水解酶和抗生 约43.5%,G,A,C,T分别占24%,30%,20%, 素，并诱导自身的能动性和趋化性，从而恢复生 26%。整个基因组还包括 10个原噬菌体插人区 长。在极端的条件下，还可以诱导产生抗逆性很 域，这些区域在基因的水平传递过程中起了很重 强的内源抱子。作为革兰氏阳性细菌的典型代 要的作用。从转录、翻译水平来看，枯草芽抱杆 表，对于其生理、生化、遗传及分子生物学的研究 菌全基因组包含蛋白编码序列(CDSs)的总量介 已有40多年的历史。近年来，随着分子生物学 于400(〕一4100个，平均长度约890坤，覆盖了全 和基因工程的发展，枯草芽抱杆菌作为基因工程 基因组87%的区域。在这些蛋白编码序列中， 表达系统发展迅速，并展现出良好的应用前景。