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第二章 原核生物基因组 临床生化教研室 原核生物 环状DNA位于细胞质中,不具成形的细胞核 细胞器无膜 细菌,立克次体,支原体,蓝藻 第一节 原核生物基因组的一般特征 第二节 质粒 第三节 基因转移 第一节 原核生物基因组的一般特征 一、原核生物基因组的结构 二、原核生物的类核结构 一、原核生物基因组的结构 1.基因组DNA分子量较小, 106~107bp之间,位于细胞中央,形成一个致密的区域,称为类核(nucleoid) 。 ? 3.原核生物的结构基因多数是单拷贝,连续排列没有内含子成分? 4.编码顺序一般不重叠 基因重叠: 基因组DNA中某些序列被两个或两个以上的基因所共用。这些基因序列之间互相有重叠。? 5.具有编码同工酶的不同基因 如E.coli 含有两个乙酰乳酸合成酶基因 不同细菌基因组GC含量比较 Whole genome of E.coli 二、原核生物的类核结构 类核(nucleoid):原核生物基因组DNA位于细胞的中央区,与支架蛋白和RNA结合在一起,以复合体的形式存在,经高度盘旋聚集形成一个较为致密的区域。 中央部分-RNA和支架蛋白 外围部分-双链闭环的超螺旋DNA 每个DNA环是一个独立的功能区,完成不同区域基因表达调控。 类核结构照片图 第二节 质 粒 一、质粒的结构与理化性质 二、质粒的命名与分类 三、质粒的生物学特征 什么是质粒(plasmid)? 是细菌细胞染色体以外的能独立复制并能稳定遗传的共价闭合环状DNA(covalently closed circular DNA,cccDNA)分子。 一、质粒的结构与理化性质 1. 质粒的结构 通常有三种构型: 共价闭环DNA分子 半开环DNA分子 线性DNA分子 2.质粒的理化性质 具有核酸分子的一般理化特性,如可嵌入某些染料(溴化乙锭, EB ),具有较强的抗切割和抗变性的 能力。 二、质粒的命名与分类 (一)质粒的命名 原则: 用小写字母 “ p”代表质粒,后面一般有2个大写字母代表,如pUC118、pMT-18T、pBR322等。 三、质粒的生物学性质 1. 质粒的主要成分 环状超螺旋DNA分子,分子量4×106~1×108dal 2. 质粒的转移 分子量在2.5×107dal以上的质粒有转移能力,可发生在同一菌属或不同菌属之间。结果使某些质粒在致病菌中播散,形成多重耐药菌株。 3. 质粒的复制 主要由4个遗传控制系统决定: 复制调控系统 分配系统 细胞分裂控制系统 位点特异重组系统 4. 质粒带有选择标记 第三节 基 因 转 移 一、基因转移的方式 二、原核生物的转座子 一、基因转移的方式 1. 接合(conjugation) 又称“细菌杂交”,是遗传物质通过细胞间的直接接触而进行的转移和重组。当细胞与细胞、或细菌通过菌毛相互接触时,质粒DNA从一个细胞(细菌)转移至另一细胞(细菌)的DNA转移称为接合作用(conjugation)。 2. 转化(transformation) 受体菌直接吸收来自供体菌的DNA片段,通过交换将其整合到自身的基因组中,从而获得供体菌部分遗传性状的现象。 4.转染(transinfection) : 病毒侵入宿主细胞的过程。若是原核生物,转染指噬菌体侵入细菌细胞过程。 1.插入序列(insertion sequence,IS) 组成: 700-2,000bp 一个转位酶基因 两侧的反向重复序列 2
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