高效液相色谱-串联质谱同时测定毛竹笋中4种内源性植物激素.PDFVIP

第41卷 分析化学(FENXIHUAXUE)研究简报 第11期 of 1739—1743 2013年11月 ChineseJournal AnalyticalChemistry 高效液相色谱-串联质谱同时测定毛竹笋中4种内源性植物激素 钟冬莲 丁明 汤富彬4 莫润宏 滕莹 (中国林科院亚热带林业研究所，国家林业局经济林产品质量检验检测中心(杭州)，富阳311400) 摘要建立了同时检测毛竹笋中赤霉素、脱落酸、吲哚-3．乙酸和吲哚-3-丁酸4种内源性植物激素的高效液 相色谱一串联质谱(HPLC—MS／MS)方法。竹笋样品经甲醇-甲酸溶液(99：1，WV)提取后，C。8固相萃取柱净化， 采用反相c，。色谱柱分离。以超纯水和甲醇溶液作为流动相进行梯度洗脱，采用多反应监测离子模式(MRM) 进行定性分析，基质标准曲线外标法进行定量分析，线性范围在2—200斗g／L之间。在5，50和200斗g／kg添 加水平下，4种内源植物激素的回收率为75．2％一105．0％；相对标准偏差为0．8％～11．4％。本方法的定量 限为0．1～1．0“g／kg。 关键词液相色谱-串联质谱法；内源植物激素；毛竹笋 1 引 言 hetero- 植物内源激素对植物生长和发育起着非常重要的调节和控制作用¨’21。毛竹(Phyllostachys CV cyclapubescens)在我国分布广，生长快，产量高，用途广，是经济价值较高的竹种之一。毛竹笋体的 生长极其迅速，在快速生长阶段，日平均生长量为35—50CB，在高峰时可达1m。毛竹笋的这种生长 发育和内源植物激素呈显著的相关性旧山J。 相色谱一串联质谱法一“u等。液相色谱一质谱联用技术具有准确、高效和高灵敏度的优点，符合目前检测 领域所追求的快速高效的要求¨2—6|，目前还未见液相色谱．串联质谱法用于同时检测竹笋中的内源植 激素的报道。本研究以毛竹笋为研究对象，建立了液相色谱一串联质谱(HPLC—MS／MS)方法测定毛竹笋 中赤霉素、脱落酸、吲哚-3一乙酸和吲哚-3_．丁酸4种内源性植物激素的检测方法，并对提取溶剂、净化用 的固相萃取小柱及过柱液中甲醇浓度进行了评价。本方法灵敏度高、重现性好。能够满足实际毛竹笋 样品中的内源植物激素的分析，为毛竹林高效培育提供技术支持。 2 实验部分 2．1仪器、材料与试剂 Premier Quattro RVl0 C。8固相萃取小柱(500me／6mL，美国Agilent公司)；IKAControl旋转蒸发仪(德国IKA公司)； 0．1 Milli—QGradient超纯水仪(美国密理博公司)；ABl04一Smg分析天平(瑞士梅特勒公司)。 ROE公司)，实验用水为二次净化水。 2．2标准溶液的配制 分别准确称取赤霉素、脱落酸、吲哚一3一乙酸和吲哚-3．丁酸标准品0．01g(精确至0．1mg)，以甲醇 mL，配成100 溶解并定容至100．0 mg／L单标母液。用甲醇稀释至1000斗g／L的混合标准溶液，再分别 用基质逐级稀释，配制成2，10，20，60，100和200斗∥L的标准工作液。 2013-06-27收稿；2013-08-14接受 _E—mail：ttb22@163．COIII 万方数据 分析化学 第41卷 2．3实验条件 色谱条件：Waters mmx3．9 SymmetryCls色谱柱(150 111111，5斗m)；柱温：35℃；进样量：10灿；流动 相