蓖麻三磷酸甘油脱氢酶基因RcGPDH-中国科学院西双版纳热带.PDF

2011 10 中国油料作物学报 年 月 2011，33 (5):451 － 458 Chinese j ournal of oil crop sciences 蓖麻三磷酸甘油脱氢酶基因 (RcGPDH)的克隆及功能分析 1，2 2 2 1，3 2* ， ， ， ， 弭宪杰 徐荣华 刘爱忠 吴 丁 田 波 (1． ， ，330045 ;2 ． ， 江西农业大学园林与艺术学院 江西南昌 中国科学院西双版纳热带植物园 ，650223 ;3． ， ，333000) 云南昆明 江西省景德镇高等专科学校 江西景德镇 : (glycerol － 3 － phosphate dehydrogenase ，RcGPDH) 摘要 为了阐明蓖麻三磷酸甘油脱氢酶基因 在蓖麻油累积过 ， (Expressed Sequence Tags ，EST ) ， RACE 程中的作用 本研究根据已报道的蓖麻种子表达序列标签 设计引物 通过 (rapid － amplification of cDNA ends) RcGPDH ， 方法克隆蓖麻 基因的全长并对其序列进行分析 构建了该基因的酵母 pYES2 ． 1/ V5 － His － TOPO － RcGPDH ， pYES2 ． 1/ V5 － His / lacZ DNA ， 表达载体 以载体 质粒 为对照 转化酵母野生型 BY4742 ， ， 菌株 运用分光光度法测定转基因酵母的生长曲线 通过香草醛法测定稳定生长期的转基因酵母的油脂含 。 ， ， 18h ; 量 结果表明 转基因菌株比转空载体对照菌株生长慢 两者均在培养 后进入平台期 两个菌株的油脂含量没 ， RcGPDH ， GPDH 有明显的差别 表明 基因对酵母油脂的累积没有起到积极的作用 在蓖麻种子中可能还存在另一个 同源基因参与三脂酰甘油(TAG)的合成。 : ; ; 关键词 蓖麻 三磷酸甘油脱氢酶 三脂酰甘油 中图分类号:Q786