RNAi介导大鼠腺苷A1和A2A受体基因沉默对.PDFVIP

·５０· 中国药理学通报　ＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＢｕｌｌｅｔｉｎ　２０１５Ｊａｎ；３１（１）：５０～５ 网络出版时间：２０１４－１２－４１３：４５　网络出版地址：ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｏｉ／１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－１９７８．２０１５．０１．０１２．ｈｔｍｌ ＲＮＡｉ介导大鼠腺苷Ａ１和Ａ２Ａ受体基因沉默对 乙醛诱导的肝星状细胞活化增殖的影响 王　琪，王　和，饶　玲，赵　晗，杨　凤，杨　岩，吕雄文，李　俊 （安徽医科大学药学院，安徽医科大学肝病研究所，安徽 合肥　２３００３２） ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－１９７８．２０１５．０１．０１２ 作用下转化成乙醛，接着在乙醛脱氢酶作用下转化 文献标志码：Ａ 文章编号：１００１－１９７８（２０１５）０１－００５０－０６ 成醋酸，最后分解为二氧化碳和水。根据文献报道， 中国图书分类号：Ｒ３３２；Ｒ３２２．４７；Ｒ３２９．２４；Ｒ３９２．１１； 乙醛在酒精性肝纤维化的形成中起到关键作用。 Ｒ５７５２ ＨＳＣ的活化增殖是肝纤维化的核心环节，肝脏受损 摘要：目的　研究大鼠腺苷 Ａ１受体（Ａ１Ｒ）和腺苷 Ａ２Ａ 时ＨＳＣ活化增殖转化为肌样成纤维化细胞，ＳＭＡ α （Ａ２ＡＲ）受体的ｓｉＲＮＡ分别转染大鼠肝星状细胞（ＨＳＣ）对 合成与分泌细胞外基质（ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｍａｔｒｉｘ，ＥＣＭ） 乙醛诱导的ＨＳＣ活化增殖的影响。方法　采用乙醛诱导 ＨＳＣＴ６建立离体的大鼠酒精性肝纤维化ＨＳＣ模型，设计并 增多，导致 ＥＣＭ合成与降解失衡［２－３］。腺苷受体 合成Ａ１Ｒ和Ａ２ＡＲ小干扰ＲＮＡ（ｓｍａｌｌｉｎｔｅｒｆｅｒｉｎｇＲＮＡ，ｓｉＲ （ａｄｅｎｏｓｉｎｅｒｅｃｅｐｔｏｒｓ，ＡＲｓ）家族包括 Ａ１、Ａ２Ａ、Ａ２Ｂ ＴＭ ＮＡ）序列，通过脂质体 Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ ２０００瞬时转染至 和Ａ３受体，属于Ｇ蛋白偶联受体超家族，广泛存在 ＨＳＣＴ６细胞内，荧光倒置显微镜观察细胞的转染效率，用四 ［４］ 于ＨＳＣ、枯否细胞（ｋｕｐｆｆｅｒｃｅｌｌ，ＫＣ）和肝细胞中 。 甲基偶氮唑盐（ＭＴＴ）法检测 ＨＳＣＴ６细胞增殖变化；利用 在酒精性脂肪肝以及肝纤维化发展过程中，腺苷和 ＲｅａｌＴｉｍｅｑＰＣＲ及Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法分别检测ＨＳＣＴ６的Ａ１Ｒ、 ＡＲｓ激活的作用受到众多研究者的关注。其中Ａ１ Ａ２ＡＲ、ＳＭＡ、ＣｏｌｌａｇｅｎＩｍＲＮＡ及蛋白表达。结果　将Ａ１Ｒ α 受体（Ａ１ｒｅｃｅｐｔｏｒ，Ａ１Ｒ）和Ａ２Ａ受体（Ａ２Ａｒｅｃｅｐｔｏｒ， 和Ａ２ＡＲｓｉＲＮＡ转染至ＨＳＣＴ６细胞内，Ａ１Ｒ和Ａ２ＡＲ基因 Ａ２ＡＲ）为高表达受体，也是４种ＡＲｓ中最主要的２ 及蛋白的表达水平明显降低；同时 ＳＭＡ、ＣｏｌｌａｇｅｎＩｍＲＮＡ α ［５］ 及蛋白表达水平亦明显降低；靶向封闭Ａ１Ｒ或Ａ２ＡＲ基因 种亚型 。有研究表明，在肝纤维化的发病机制 的表达可明显抑制ＨＳＣＴ６细胞的活化增殖。结论　靶向封 中，腺苷受体活化扮演着重要的角色，有望成为预防 ［６］ 闭Ａ１Ｒ或Ａ２ＡＲ基因的