2017-2018学年辽宁省北票市高级中学高中生物选修1课件：2.3分解纤维素的微生物的分离.pptVIP

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 培养基组成 提供的主要营养物质 CMC-Na 5~10g 碳源 酵母膏 1g 碳源、氮源、特殊营养物质 KH2PO4 0.25g 无机盐 土豆汁 100mL 碳源、特殊营养物质 琼脂 15g 凝固剂 上述物质溶解后，加蒸馏水定容至1000mL 氢元素、氧元素 鉴别纤维素分解菌的培养基 (水溶性羧甲基纤维素钠) 练一练 1、在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌，符合下列哪一生物学观点？（ ） A、生物结构与功能相适应的观点 B、生物结构与功能整体性观点 C、生物与环境相适应的观点 D、生物发展进化的观点 2、从土壤中分离获得某种微生物的步骤是（ ） ①土壤取样 ②梯度稀释 ③选择培养 ④菌悬液涂布平板 ⑤挑选出单个菌落 A、 ①②③④⑤ B、①③②④⑤ C、 ①②④③⑤ D、①④②③⑤ 3、有关选择培养正确的叙述是（ ） A、可以增加纤维素分解菌的浓度 B、可以减少纤维素分解菌的浓度 C、所用培养基是固体培养基 D、所用培养基是平板培养基 C B A 比较项目 分解尿素的细菌 纤维素分解菌 选 择 培养 基 原理 培养基类型 目的 将细菌涂布在只有 尿素做氮源的选择 培养基上 将细菌培养在纤维素 粉为主要碳源的 选择培养基上 固体培养基 液体培养基 筛选菌株 选择培养，增加浓度 分离纤维素分解菌的培养基和分离分解尿素的细菌的培养基的比较。 比较 项目 分解尿素的细菌 纤维素分解菌 鉴 别 培养基 原理 现象 方法 细菌合成的脲酶将尿素分解成了氨，氨会使培养基的碱性增强，pH升高。在培养基中加入酚红指示剂，指示剂会变红 刚果红可以与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶催化分解后，红色复合物无法形成，培养基上就会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈 观察菌落周围是否有红色的环带出现来鉴定尿素分解菌 观察菌落周围是否出现 透明圈来筛选纤维素分解菌 尿素为唯一氮源的培养基上加入酚红指示剂 刚果红染色法 在产生纤维素酶的菌落周围会出现透明圈，挑取并接种到纤维素分解菌的选择培养基上，在300C－ 370C培养，可获得纯化培养。 5、挑选产生透明圈的菌落 思考：本实验的流程与课题2中的实验流程有哪些异同？ 本实验流程与课题2的流程的区别如下。课题2是将土样制成的菌悬液直接涂布在以尿素为唯一氮源的选择性培养基上，直接分离得到菌落。本课题通过选择培养，使纤维素分解菌得到增殖后，再将菌液涂布在鉴别培养基上。其他步骤基本一致。 四、结果分析与评价 1.培养基的制作是否合格以及选择培养基是否筛选出菌落 对照的培养基在培养过程中没有菌落生长则说明培养基制作合格。 如果观察到产生透明圈的菌落，则说明可能获得了分解纤维素的微生物。 为了确定分离得到的是纤维素分解菌，还需要进行_____________实验，纤维素酶的发酵方法有______ 发酵和______ 发酵。纤维素酶测定方法是对纤维素酶分解滤纸等纤维素所产生的________ 含量进行定量测定。 发酵产纤维素酶 液体 固体 葡萄糖 五、课题延伸 分解纤维素的微生物的分离 纤维素酶 组成、作用、 刚果红染色 筛选原理 实验设计 土壤取样 选择培养 涂布培养 纯化培养 前置染色法 后置染色法 富含纤维素土壤 增大纤维素分解菌含量 染色鉴别 分离出分解菌 课堂总结 1.【生物 选修1：生物技术实践（15分） 有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从污染的土壤中筛选出高效降解原油的菌株。回答问题： ⑴在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以 为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于 培养基。 ⑵纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即 和 。 石油 选择 平板划线法 稀释涂布平板法 当堂训练 ⑶为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力 。 ⑷通常情况下，在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有 、 和 。无菌技术要求试验操作应在酒精灯 附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。 强 灼烧灭菌 干热灭菌法 高压蒸汽灭菌法 火焰 2．如图为分离并统计分解纤维素的微