基因功能王分析的基本策略.pptVIP

第十二章;转基因模型是研究基因功能的主要手段;第一节 转基因技术;一.转基因生物的意义;;二、基本原理;基本原理;基本原理;基本原理;基本过程;1. 上游—基因改造和载体构建;动物转基因常用的载体;2. 中游—基因转移、胚胎移植与建系;1) DNA显微注射法;DNA 显微注射;;DNA 显微注射;DNA 显微注射法的特点;提高显微注射 DNA 表达的成功率;;2) 胚胎干细胞法;胚胎干细胞法;胚胎干细胞的分离和培养;胚胎干细胞的分离和培养;胚胎干细胞外源 DNA 的导入;外源 DNA 的整合;胚胎干细胞法的特点;;3）逆转录病毒感染法;逆转录病毒感染法;逆转录病毒感染法的特点;4）精子载体法;DNA;3. 下游—基因整合与表达检测及筛选;鉴定方法;基因转移鼠纯合鼠系的建立;三、转基因动物的应用;人类疾病的转基因动物模型;人类疾病的转基因动物模型;利用转基因动物反应器生产药用蛋白;转基因改良移植器官;动物的克隆;??移植技术（Nuclear Transfer);;第二节 基因打靶;一、基因打靶的基本程序;1. 打靶载体的构建;2. 打靶载体导入ES细胞;打靶载体的正-负选择;打靶载体的正筛选;打靶载体的负筛选;PCR 鉴定;PCR 鉴定：特异整合;基因敲除小鼠的获得;;基因敲除和 RNA 干扰;第三节 RNA 干扰;RNA 干扰是dsRNA 导致的基因沉默;RNAi 是真核生物