专题1基因相工程12基因工程的基本操作程序修改.pptVIP

1.2基因工程的基本操作程序;1.从自然界中已有的物种中分离出来，如从基因组文库或cDNA文库中获取。 ;mRNA;蛋白质的 氨基酸序列;从基因文库中获取目的基因;用适当 限制酶切割;;（1）基因文库组的构建方法;1、原核细胞的基因结构;①不能转录为信使RNA，不能 编码蛋白质。;;真核细胞的 基因结构;;（PCR，polymerase chain reaction ）;① 概念：PCR全称为_______________，是一项 在生物____复制___________的核酸合成技术 ;⑥过程：;;②用__________切割目的基因，使其产生 。;;（一）构建目的;③终止子;三 将目的基因导入受体细胞;1、将目的基因导入植物细胞的方法： （1）农杆菌转化法 ①农杆菌特点：;③过程：;（2）基因枪法 （3）花粉管通道法;2、将目的基因导入动物细胞 ①方法：显微注射法 ②程序： ;显微注射法; 3、将目的基因导入微生物细胞 ①原核生物特点：繁殖快、单细胞、遗传物质少 ②方法： ;四、目的基因的检测与鉴定;(检查是否成功);1. 检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因 ;2. 检测目的基因是否转录出了mRNA ;① 方法：抗原—抗体杂交;归纳步骤;归纳: 基因工程的基本操作程序;练习1：(2008理综山东卷)为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。 （1）获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作用于图中的 处，DNA连接酶作用于 处。（填“a”或“b”）;练习1：(2008理综山东卷)为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。 （2）将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转化法和 法。 （3）由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用 技术，该技术的核心是 和 。 （4）为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的 作探针进行分子杂交检测，又要用 方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。;答案：（1）a a （2）基因枪法（花粉管通道法） （3）植物组织培养（1分） 脱分化（去分化） 再分化 （4）耐盐基因（目的基因） 一定浓度盐水浇灌（移栽到盐碱地中） ;1）以下说法正确的是 （ ） A、所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 B、质粒是基因工程中唯一的运载体 C、运载体必须具备的条件之一是：具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接 D、基因控制的性状都能在后代表现出来;2）不属于质粒被选为基因运载体的理由是 A、能复制 （ ） B、有多个限制酶切点 C、具有标记基因 D、它是环状DNA;3）有关基因工程的叙述中，错误的是（ ） A、DNA连接酶将黏性末端的碱基对连接起来 B、 限制性内切酶用于目的基因的获得 C、目的基因须由运载体导入受体细胞 D、 人工合成目的基因不用限制性内切酶;4）有关基因工程的叙述正确的是 （ ） A、限制酶只在获得目的基因时才用 B、重组质粒的形成在细胞内完成 C、质粒都可作为运载体 D、蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料;5）基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的步骤是 （ ） A、人工合成目的基因 B、目的基因与运载体结合 C、将目的基因导入受体细胞 D、目的基因的检测和表达;(四)目的基因的检测与鉴定;常用的受体细胞：;方法;(检查是否成功);易感染双子叶植物和裸子植物。Ti质粒的T-DNA可转移至受体细胞的染色体上;2.微生物作受体细胞原因：;显微注射法; 该方法是根据碱基互补配对原则，把互补的双链DNA解开，把单链的DNA小片段用同位素、荧光分子或化学发光剂等进行标记，之后同被检测的DNA中的同源互补序列杂交，从而检出所要查明的DNA或基