苹果树腐烂病菌菌丝蛋白双向电泳体系的建立-西北农林科技大学学报.PDF

第 卷 第 期 西北农林科技大学学报自然科学版 年 月 网络出版时间 网络出版地址 苹果树腐烂病菌菌丝蛋白双向电泳体系的建立 冯 浩王海英冯雅琼高小宁韩青梅黄丽丽 西北农林科技大学 植物保护学院旱区作物逆境生物学国家重点实验室陕西 杨凌 摘 要 目的建立苹果树腐烂病菌菌丝蛋白双向电泳体系鉴定不同致病力材料的差异表达蛋白为从蛋 白质组学角度揭示苹果树腐烂病菌致病机理奠定基础方法以苹果树腐烂病菌野生型 菌丝为材料从蛋白 提取方法 胶条长度及胶条的 范围 个方面对双向电泳体系进行优化并利用该优化体系对苹果树腐烂病 菌野生型 和致病力丧失突变体 的菌丝蛋白进行双向电泳分析和比较对二者的差异表达蛋白进行鉴定和 分析结果采用 丙酮法 酚蛋白抽提法及 胶条对苹果树腐烂病菌菌丝蛋白 进行双向电泳可以得到理想的蛋白图谱利用该体系对苹果树腐烂病菌野生型菌株 及其致病力丧失突变体菌 株 的菌丝总蛋白进行双向电泳分析发现 个菌株共存在 个差异表达蛋白点其中有 个显著差异表达蛋 白点质谱分析结果表明突变体 中缺失的 个蛋白点 和 分别为丝氨酸苏氨酸蛋白激酶和假想蛋 白其他 个显著差异表达蛋白点分别为 个微管蛋白 个线粒体内膜转移酶亚基 个丙酮酸脱羧氧化酶 个 腺苷高半胱氨酸激酶 个压力诱导的磷蛋白 个己糖磷酸肌醇激酶 个热激蛋白和 个假想蛋白 分析表 明该差异蛋白主要参与能量代谢胁迫应答细胞结构组成和未知功能结论建立了适合苹果树腐烂病菌菌丝 蛋白的双向电泳体系并通过该体系分析获得了不同致病力材料的一系列差异表达蛋白 关键词 蛋白提取双向电泳蛋白质组质谱鉴定苹果树腐烂病菌