重组dna技术-2点011-04-13.pptVIP

重组DNA技术 (DNA克隆或分子克隆) DNA Recombination Technique ( DNA Cloning or Molecular Clone) 1944年 O.T.Avery的肺炎球菌转化实验: (二)目的基因 进行DNA重组的目的主要有两方面： ① 分离获得某一感兴趣的基因或DNA ② 获得感兴趣基因的表达产物（蛋白质） 这些使我们感兴趣的基因或DNA序列就是目的基因(target DNA)。 目的基因有两种类型： cDNA(complementary DNA):在体外经反转录合成的．与mRNA互补的DNA。 基因组DNA(Genomic DNA):代表一个细胞或生物体整套遗传信息的所有DNA序列。 (三)载体 一.表达载体(expression vector): 为使插入的外源DNA序列可转录翻译成 多肽链而特意设计的载体称为表达载体。 二.克隆载体(Cloning vector): 为使插入的外源DNA序列被扩增而特意设计的载体称为克隆载体。 常用质粒载体 （一） pBR322质粒：由一系列大肠杆菌质粒DNA通过重组技术构建成，长度为4.36kb，特点： （1）含有复制起始点和复制调节信号； （2）有单个EcoRI酶切位点，可切开插入目的基因； （3）有抗四环素基因Ter+和抗氨苄青霉素基因 Amp+，便于重组体细胞的筛选