表观遗传学研究实验技术简介.pptVIP

DNA甲基化分析技术 ⑩甲基化敏感性斑点分析(methylation sensitive dot blotassay， M5-DBA) 过程:待测DNA样本经重亚硫酸盐处理后，以非CG区的引物进行PCR扩增，扩增产物经变性后转移到尼龙膜上平用3端DIG标记的含有2个CG(或TG)的政核昔酸探针与DNA杂交，随后用带有荧光标记的抗DIG抗体与之反应。与双CG的探针获得杂交的标本含有甲基化，而与TG探针杂交的标本未被甲基化。通过比较斑点上荧光的强度测定甲基化水平。 DNA甲基化分析技术 DNA甲基化微阵列法 差式甲基化杂交(differential methylation hybridization，DMH)技术 对整个基因组范围内高甲基化CpG岛(CpG islands， CGIs)特异性筛选应用了基于甲基化敏感限制酶(methylation sensitive restriction enzymes， MERS)酶切和连接子PCR(linker-PCR)技术的差式甲基化杂交（DHM）技术。 DMH可选择性扩增和双色荧光标记肿瘤细胞和正常细胞的甲基化CpG岛，根据其混合物与CGIs微阵列杂交荧光信号的变化而获得肿瘤细胞∞Is甲基化谱。 DNA甲基化分析技术 甲基化特异性寡核昔酸(methylation specific oligonuleotide， MSO)微阵列 MSO对每一