浙江大学王镜岩生物化学甲上第03章个氨基酸.ppt

Chapter 3 氨基酸 蛋白质是生物功能的体现者，而构成蛋白质的基本单位是氨基酸。蛋白质在酸、碱或酶的作用下，可逐步降解为氨基酸。组成蛋白质的氨基酸常见的有20种。成千上万的不同蛋白质实际上就是氨基酸的种类、数目及排列顺序不同。 Section 1 蛋白质水解 用H+，OH-或酶将蛋白质彻底水解，可以得到许多种氨基酸的混合物，说明氨基酸是蛋白质的基本结构单位。 蛋白质→ 蛋白胨 → 多肽 → 二肽 → 氨基酸 Mr： 大于 104 2x103 1000—500 200 100 1、酸水解 条件：5—10倍的20%的盐酸煮沸回流16—24小时，或加压于120℃水 解2小时。 优点：可蒸发除去盐酸，水解彻底，终产物为L—α—氨基酸，产物单一，无消旋现象。??? 缺点：色氨酸破坏，并产生一种黑色的物质：腐黑质，水解液呈黑色。 2、???? 碱水解 条件：4mol/L Ba(OH)2 或6mol/L NaOH煮沸6小时。 优点：水解彻底，色氨酸不被破坏，水解液清亮。 缺点：产生消旋产物，破坏的氨基酸多，一般很少使用。 3、??????蛋白酶水解 条件：蛋白酶如胰蛋白酶、糜蛋白酶，常温37—40℃，pH值5—8 优点：氨基酸不被破坏，不发生消旋现象。 缺点：水解不完全，中间产物多。 蛋白质酸碱水解常用于蛋白质的组成分析，而酶水解用于制备蛋白质水解产物。 Section 2 氨基酸的结构通式 2、构成蛋白质的氨基酸的结构特征 （1）除Pro外，都属α-氨基酸，Pro 为α-亚氨基酸： （2）都属L-氨基酸； （3）除Gly外，都具有旋光性； （4）为两性电解质。 由于R基团不同，各种氨基酸在性质上的差异很大，如吸收光谱、等电点（pI）、解离常数（Ka）、颜色反应、稳定性、对金属的络合能力等。因此，不同氨基酸组成的蛋白质，性质和功能千差万别。 1.构成蛋白质的20种氨基酸 2.人体所需的八种必需氨基酸 Section 4 氨基酸的重要理化性质 1.一般物理性质 常见氨基酸均为无色结晶,其形状因构型而异 酪氨酸的?max＝275nm，?275=1.4x103; 苯丙氨酸的?max＝257nm，?257=2.0x102; 色氨酸的?max＝280nm，?280=5.6x103; 2.氨基酸的两性解离性质 氨基酸在结晶形态或在水溶液中，并不是以游离的羧基或氨基形式存在，而是离解成两性离子。在两性离子中，氨基是以质子化(-NH3+)形式存在，羧基是以离解状态(-COO-)存在。 在不同的pH条件下，两性离子的状态也随之发生变化 氨基酸既含有氨基，能像碱一样接受H+，又含有羧基，像酸一样可电离出H+，所以氨基酸具有酸碱两性性质，是一类两性电解质。 As an acid（proton donor）： As a base（proton acceptor）： 不同pH时氨基酸以不同的离子化形式存在： 氨基酸所带静电荷为“零”时，溶液的pH值称为该氨基酸的等电点（isoelectric point），以pI表示。 实验证明在等电点时，氨基酸主要以两性离子形式存在，但也有少量的而且数量相等的正、负离子形式，还有极少量的中性分子。 当溶液的pH=pI时，氨基酸主要以两性离子形式存在。 pHpI时，氨基酸主要以正离子形式存在。 pHpI时，氨基酸主要以负离子形式存在。 3.氨基酸的等电点 各种aa都有各自的等电点。在酸性溶液中（pH pI)带正电荷；在碱性溶液中（pHpI)带负电荷。 例：在pH=6.0的混合溶液中 Ala—兼性离子 Lys—带正电荷 Glu—带负电荷 在溶液的任一条件下： pH=pKa+lg[质子受体]/[质子供体] 对于中性aa，加酸 pKa 取pKa1 加碱 pKa 取pKa2 知道了溶液的pH，即可计算出在任一pH条件下，一种aa中各种离子的比例。 4.氨基酸的化学性质 (1)与茚三酮的反应 (2)与甲醛反应 反应特点 A.为α- NH2的反应 B.在常温，中性条件，甲醛与α- NH2很快反应，生成羟甲基衍生物，释放氢离子。 应用：氨基酸定量分析—甲醛滴定法（间接滴定） A.直接