发酵分析—抗生素微生物检定法..ppt

* * 恒温水浴有使用溶出度仪的、恒温水浴箱的，带有搅拌装置。 在生物生长过程中根据生物生长特性，自动判别终点，生成唯一报告 可随即排列比色皿，也可按照设定标准排列 培养皿（比色皿）之间的培养环境温度误差几乎为零，降低了生物生长由于温度梯度得变化产生的误差－－比色皿放置在培养仓不停得转动，使得每个比色皿培养环境都是一样的 总的温度控制更是采用最先进的pid控制 误差控制在0.1摄氏度 在线进行操控增加了对试验的操控性（ 再不会象抑菌圈测量那样必须培养十几个小时后 才能看到测得结果 判断是否正确 ） 随时根据数据 及时发现漏洞。。。 测量结果直观，精确 以上特点可以使您在生产过程中缩短了实验周期，给药品的生产厂家带来了可观的经济效益；在医疗、科研、高等院校等机构中，利用本仪器可以对药物效力及抗生素和微生物之间量的关系进行分析。 菌液的浓度（吸光度）： 分光光度计最正确的测量范围在0.3～0.7。比浊测定时，控制菌液浓度的吸收度应控制在此范围内，可获得较为正确的结果。 菌液需新鲜配制： 当天使用，若放在冰箱放置一段时间后再使用，所测定的数据不稳定，误差大（金葡）。因为菌液在放置一段时间后，细菌老化死亡，但测定的吸收值不变，从而影响试验时活菌的量，使结果产出偏差。 注意菌种使用不超过5代。 比浊法的特点： 优点： 与管碟法比较，比浊法具有快速，试验过程3～4小时，加上其他操作，可在当天获得结果； 采用液体培养基，无扩散因素的影响，试验的灵敏度高，结果的精密度和正确度都较琼脂扩散法好。 比浊法的特点： 缺点： 对试验仪器的性能及试验器具的要求较高，如培养温度要求一致，比色管的清洁等。 任何影响液体培养基内微生物生长的因素都会影响抗生素效价的测定。 比浊仪 可选择多个实验波长 根据药典采用了3个波长530、580、650，用户可以根据要求进行实验！ 钨灯 滤光片 透镜 培养皿 透镜 接收器 自动判别，生成唯一报告 在生物生长过程中根据生物生长特性，自动判别，生成唯一报告 CBZ-1抗生素比浊法测量仪 对微生物进行在线监测、测控、培养并在线完成测量 CBZ-1抗生素比浊法测量仪 中国药典2005版比浊法品种：硫酸庆大霉素的效价测定 抗生素 试验菌 培养基 灭菌缓冲液pH值 抗生素浓度范围单位/ml 培养 类别 条件 　 编号 pH值 温度/℃ 庆大霉素 金黄色葡萄球[CMCC(B)26003 III 7.0~7.2 7.8 0.15~1.0 35~37 应用举例 （1）试验菌液的配制：取金黄色葡萄球菌[CMCC(B)26003]的营养琼脂斜面培养物，接种于营养琼脂斜面上，在35～37℃培养20～22小时后，用0.9%灭菌氯化钠溶液洗下菌苔，并用0.9%灭菌氯化钠溶液稀释，使其在650nm波长处的吸收值为1.0。 （2）含试验菌的液体培养基配制：取试验菌液1.5ml置100mlpH7.0～7.2培养基III中，摇匀，备用。 临用前，取规定的试验菌悬液适量（ 35～37℃培养3～4小时后测定的吸光度在0.3 ～0.7之间，且剂距为2的相邻剂量间的吸光度差值不小于0.1），加入到各规定的液体培养基中，混合。 使在实验条件下能得到满意的剂量-反应关系和适宜的测定浊度。 已接试验菌的液体培养基应立即使用。 阳性对照：取1支试管，加入灭菌水1.0ml，再加入含试验菌的液体培养基9.0ml。 阴性对照（空白对照）：取1支试管，加入灭菌水1.0ml，再加入含试验菌的液体培养基9.0ml，立即加入甲醛溶液0.5ml，混匀，作为吸光度测定的空白液。 （4）效价测定： 标准品溶液的配制：取庆大霉素标准品适量，精密称定，用灭菌水制成1000u/ml的溶液，精密量取溶液适量，用pH7.8磷酸盐缓冲液稀释成0.4和0.8u/ml(1:2)的溶液。 分别精密量取高低剂量的供试品溶液和对照品溶液各1.0ml，置灭菌试管中，每个浓度6管，分别加入实验培养基9.0ml，立即摇匀，置37℃水浴培养3～4小时，取出，立即加入甲醛溶液，摇匀，照分光光度法，在530nm波长处测定吸收值，照生物检定统计法（附录XIV）中的2.2法计算，同时与管碟法进行了比较，结果如下： 测定结果的比较 * * * 以抗生素活性成分的重量计量抗生素的效价单位，已经得到了共识，目前新开发的各类抗生素，无论其以各类盐的形式存在，或以其前药各类酯的形式存在，抗生素的效价单位均采用活性成分的重量表示。 * * 抗生素微生物检定法是国际上通用的、经典的抗生素效价测定方法。自20世纪40年代建立至今，在各国药典中被普遍采用。 * * * * 管碟法是目前抗生素效价测定的国际通用方法。 * 在摊布试验菌的琼脂培养基平板上，安置不锈钢小管，在小管