第六章 RNA的合成..ppt

第六章 RNA的合成 核糖核酸(ribonucleic acid, RNA)的合成是以DNA为模板,合成核糖核酸链,这个过程称为转录(transcription) 第一节 概述 DNA→RNA→蛋白质这样一个信息流中,RNA是中心环节。 DNA分子所储藏的蛋白质遗传信息,必须转变成信使RNA分子(mRNA）,才能到达蛋白质合成的工厂一核糖体,然后,蛋白质合成酶系才能把mRNA所带来的信息翻译成蛋白质。在合成蛋白质过程中,还必须有能携带氨基酸的tRNA和构成核糖体的rRNA。这三类RNA都必须以DNA为模板,在依赖于DNA的RNA聚合酶催化之下合成。 DNA→RNA→蛋白质 转录是基因表达的第一步,也是最关键的一步。生物体基因表达调控的第一步也就是决定是否要让该基因转录。对于大多数基因来说,这是最重要的调控机制。 转录过程涉及到两个方面:一是RNA合成的酶学过程,二是RNA合成的起始信号和终止信号,也就是DNA分子上的特定序列。 关于DNA和RNA 的碱基序列,方向总是从5‘→3’ 。 把作为模板转录的链称为反义链(antisense strand)或模板链(template strand)。选用非模板链的序列作为有义链,其方向和核苷酸序列都与这一区域转录出来的RNA序列相一致(只是T和U的区别而已)。 第二节 RNA的结构和种类 RNA与DNA的差异 DNA RNA 糖 脱氧核糖 核糖 碱基 AGCT AGCU 不含稀有碱基 含稀有碱基 RNA分子有三大类，即 信使RNA ( messenger RNA, mRNA) 核糖体RNA ( ribosomal RNA, rRNA) 转移RNA ( transfer RNA, tRNA) 所有这些RNA都按DNA碱基序列合成，这三类RNA结构与功能均不一样。 mRNA的分子结构 原核生物mRNA特征 先导区+翻译区（多顺反子）+末端序列 真核生物mRNA特征： “帽子”（m7G-5′ppp5′-N-3′p）+单顺反子+“尾巴”（Poly A） rRNA的分子结构 特征：?单链，与蛋白质组成核糖体后方能发挥其功能。 原核生物由5S rRNA，16S rRNA，23S rRNA组成 真核生物由5S rRNA，5.8S rRNA，18S rRNA和28S rRNA组成。 第三节 RNA酶促合成的特点 RNA合成的基本特征 1.RNA的前体是四种核糖核苷三磷酸(NTP) ATP、GTP、CTP和UTP 2.RNA链的生长方向也是从5‘→3’　 3.转录必须以一条DNA链为模板,按照碱基互补的原则进行转录.A-U,C-G 第四节 原核生物RNA聚合酶 一、RNA聚合酶的结构 E.coli RNA聚合酶由五个亚基所组成,即α2ββ‘σ。α、β、β’、σ四种亚基的分子量分别为36.5KDa、151KDa、155KDa、70KDa,整个酶分子的分子量为465KDa 。有时还可以看到与RNA聚合酶相结合的一个很小的蛋白质 ，叫做ω亚基,其功能尚不清楚 。 α、β、β、σ分别是基因rpoA、rpoB、rpoC和rpoD的产物 α2ββ‘σ这样的整个酶分子称为“全酶”( Holo-enzyme )。 而σ亚基解离后的其余部分(α2ββ‘)称为核心酶(Core enzyme) 。 σ亚基的最主要的功能是识别启动子,特别是启动子上的R位点。 细胞内哪条链被转录(即转录的方向),转录的起点的选择都与σ亚基有关。体外转录实验中,用全酶可得到与体内相同的结果；而用核心酶时,模板链和起始点的选择都有很大的随意性。 β亚基可能参与底物(包括前体核苷三磷酸以及已经形成的RNA链)的结合以及催化磷酸二酯键的形成。 在E.coli细胞内,某些药物能有效地抑制基因转录,如利福霉素类药物和链霉溶菌素(streptolydigin)。前者能抑制RNA合成的起始,后者能抑制RNA链的延伸。实验也表明,这两种药物均作用于β亚基。同时还发现β亚基与RNA的前体核苷三磷酸具有很高的亲和力。 α亚基可能参与全酶和启动子的牢固结合。 在大肠杆菌被T4噬菌体侵染时,α亚基上的一个精氨酸发生了ADP核糖基化的修饰,从而降低了RNA聚合酶(全酶)对于寄主启动子的亲和力,而同时提高了与T4基因启动子的亲和力。 这一牢固结合需要DNA双螺旋的局部解链;当RNA聚合酶核心酶沿着模板移动进行RNA链的延伸时,需要不断地在前面解开双螺旋,在后面恢复双螺旋,这些作用可能与两个α亚基的功能有关。