原思核基因表达调控-研.ppt

第六章 基因的表达与调控(上) ——原核基因表达调控模式;Contents;第一节 基因表达调控的基本概念; 组成性表达(constitutive expression) 适应性表达(adaptive expression）; 1、组成性表达： ; 2、适应性表达 指环境的变化容易使其表达水平变动的一类基因表达。 应环境条件变化基因表达水平增高的现象称为诱导(induction)，这类基因被称为可诱导的基因(inducible gene)； 相反，随环境条件变化而基因表达水平降低的现象称为阻遏(repression)，相应的基因被称为可阻遏的基因(repressible gene)。 ;三、基因表达的规律 ——时间性和空间性;;2、空间特异性(spatial specificity);四、基因表达调控的生物学意义;第二节 原核基因调控机制;一、基因表达调控环节;;;Jacob and Monod;2、操纵子的定义;;;;可诱导调节：指一些基因在特殊的代谢物或化合物的作用下，由原来关闭的状态转变为工作状态，即在某些物质的诱导下使基因活化。 例：大肠杆菌的乳糖操纵子 分解代谢蛋白的基因;;可阻遏调节：基因平时是开启的，处在产生蛋白质或酶的工作过程中，由于一些特殊代谢物或化合物的积累而将其关闭，阻遏了基因的表达。 例：色氨酸操纵子 合成代谢蛋白的基因;酶合成的阻遏操纵子模型 ;3、在负转录调控系统中，调节基因的产物是阻遏蛋白（repressor），起着阻止结构基因转录的作用。 根据其作用特征又可分为负控诱导和负控阻遏： 在负控诱导系统中，阻遏蛋白与效应物（诱导物）结合时，结构基因转录； 在负控阻遏系统中，阻遏蛋白与效应物（辅阻遏物）结合时，结构基因不转录。;4、在正转录调控系统中，调节基因的产物是激活蛋白（activator）。 根据激活蛋白的作用性质分为正控诱导和正控阻遏 在正控诱导系统中，效应物分子（诱导物）的存在使激活蛋白处于活性状； 在正控阻遏系统中，效应物分子（辅阻遏物）的存在使激活蛋白处于非活性状态。;正控诱导;四、转录水平上调控的其他形式;大肠杆菌中的各种σ因子比较;温度较高,诱导产生各种热休克蛋白 由σ32参与构成的RNA聚合酶与热休克应答基因启动子结合,诱导产生大量的热休克蛋白,适应环境需要;2. 降解物对基因活性的调节;3. 弱化子对基因活性的影响 属于这种调节方式的有大肠杆菌中的色氨酸操纵子、苯丙氨酸操纵子、苏氨酸操纵子、异亮氨酸操纵子等等。 起信号作用的是有特殊负载的氨基酰-tRNA的浓度，在色氨酸操纵子中就是色氨酰-tRNA的浓度。 当操纵子被阻遏，RNA合成被终止时，起终止转录信号作用的那一段核苷酸被称为弱化子。这种因为核糖体在基因转录产物上的不同位置，决定了RNA可以形成哪一种形式的二级结构、并由此决定基因能否继续转录的调节方式确实是非常巧妙的。 起调节作用的信号分子是细胞中某一氨基酸或嘧啶的浓度，因此是转录调节中的微调整，好比无线电调谐器中的微调一样，只要稍加变动就可影响整个体系的功能。;4.细菌的应急反应;小结;第三节 乳糖操纵子(lac operon);一、乳糖操纵子的结构;Z编码β-半乳糖苷酶：将乳糖水解成葡萄糖和半乳糖 Y编码β-半乳糖苷透过酶：使外界的β-半乳糖苷（如乳糖）能透过大肠杆菌细胞壁和原生质膜进入细胞内。 A编码β-半乳糖苷乙酰基转移酶：乙酰辅酶A上的乙酰基转到β-半乳糖苷上，形成乙酰半乳糖。;二、酶的诱导——lac体系受调控的证据 ;; 把大肠杆菌细胞放在加有放射性35S标记的氨基酸 但没有半乳糖诱导物的培养基中繁殖几代 然后再将这些带有放射活性的细菌转移到不含35S、无放射性的培养基中 随着培养基中诱导物的加入，β-半乳糖苷酶便开始合成 分离β-半乳糖苷酶，发现这种酶无35S标记 说明酶的合成不是由前体转化而来的，而是加入诱导物后新合成的 ;;Jacob和Monod认为诱导酶（他们当时称为适应酶）现象是个基因调控问题，可以用实验方法进行研究，因此选为突破口，终于通过大量实验及分析，于1961年建立了该操纵子的控制模型。 ;机制：阻遏蛋白的负性调节;安慰诱导物： 如果某种物质能够促使细菌产生酶而本身又不被分解，这种物质被称为安慰诱导物，如IPTG（异丙基- β –D-硫代半乳糖苷）。;三、乳糖操纵子调控模型;② 这个mRNA分子的启动子（P）紧接着操纵基因（O），而位于调节基因（I）与O之间的启动子P，不能单独启动合成β-半乳糖苷酶