miR-124靶向STAT3改善脑恶性胶质瘤细胞辐射敏感性.PDFVIP

·放射生物学· miR-124 靶向 STAT3 改善脑恶性胶质瘤细胞辐射敏感性 1 1 1 1 2 3 马建 王新军 付旭东 周少龙 田碧 闫琳 1 2 2 郑州大学第五附属医院神经外科 450001 ； 郑州大学第五附属医院放疗科450001 ； 郑州 大学第五附属医院肿瘤科450001 通信作者：王新军，Email ：wangxj@zzu.edu.cn 【摘要】 目的 研究 miR-124 在放射敏感及耐受的脑恶性胶质瘤细胞 LN229 和 LN229R 中的表达以 及 miR-124 对细胞放射敏感性的影响，并深入探讨 miR-124 调控 LN229R 细胞放射敏感性的作用机制。方 法 将 miR-124 模拟物（miR-124 ）及阴性对照（miR-NC ），STAT3 过表达质粒（STAT3）及pcDNA3.1 质粒（pcDNA ）单独或共转染到放射抵抗的胶质瘤细胞LN229R 中。qRT-PCR 检测 LN229 和 LN229R 细胞 中miR-124 的表达；克隆形成实验分析不同放射剂量下LN229R 细胞的生存率以及敏感性相关参数值；流 式细胞术分析 LN229R 细胞的凋亡情况；生物信息学预测 miR-124 和 STAT3 的靶向关系，并利用双荧光素 酶报告分析加以验证；Western blot 分析 STAT3 的蛋白表达水平。结果 与 LN229 组（1.02±0.09）相比， miR-124 在 LN229R 细胞中的表达水平（0.32±0.03 ）显著降低，差异有统计学意义（t=12.780 ，P ＜0.05 ）； 与 miR-NC 组（0.95±0.06 ）相比，转染miR-124 模拟物可促进 LN229R 细胞中 miR-124 的表达（4.02±0.39 ） （t=13.476 ，P ＜0.05 ）；8 Gy 照射条件下，miR-124 过表达组癌细胞的生存率（0.003±0.0004 ）显著低于 miR-NC 组（0.033±0.005 ）（t=5.655 ，P ＜0.05 ），细胞凋亡率（22.34±2.42 ）显著高于miR-NC 组（4.69±0.51 ） （t=12.361 ，P ＜0.05 ）；STAT3 是 miR-124 的靶基因；外源回补 STAT3 可逆转 miR-124 对 LN229R 细胞生 存的抑制作用。结论 miR-124 通过靶向 STAT3 改善 LN229R 细胞的放射敏感性。 【关键词】胶质瘤细胞；放射敏感性；miR-124 ；STAT3 DOI ：10.3760/cma.j.issn.0254-5098.2019.02.000 miR-124 increases the radiosensitivity of glioblastoma cells through targeting 1 1 1 1 2 3 STAT3 Ma Jian ，Wang Xinjun ，Fu Xudong ，Zhou Shaolong ，Tian Bi ，Yan Lin 1Department of Neurosurgery, The Fifth Affiliated Hospital of Zhengzhou University ，Zhengzhou 2 450001, China； Department of Radiotherapy, The Fifth Affiliated Hospital of Zhengzhou 3 University，Zhengzhou 4500001, China ；Department of Oncology ,The Fifth A