GB 8381_饲料中黄曲霉素B1的测定方法.pdfVIP

中华人 民共和 国国家标准 UDC 636.085 ,543.062 饲料中黄曲霉素B:的测定方法 GB 8381一 87 Themethodofdetermination of aflatoxinB,infeedstuff 本标准参照采用国际标准ISO6651-1983(E)《饲料中黄曲霉素B，的测定方法》。 1 适用范围 本标准适用于各种单一饲料和配合饲料。 2 原理 样品中黄曲霉素B,经提取、柱层析、洗脱、浓缩、薄层分离后 在波长365nm紫外灯光下产生蓝紫 色荧光，根据其在薄层上显示荧光的最低检出量来测定含量。 3 试剂 3 1 三氯甲烷(GB682- 78), 2 3 正己烷(HG3- 1003-76). 3 5 . 甲醉(GB683- 79), 4 5 . 苯(GB690- 77), 抓 乙睛(HGB3329-60)。 6 3 无水乙醚或乙醚经无水硫酸钠脱水(HGB1002-76), 3 7 丙酮(GB686- 78) 以上试剂于试验时先进行一次试剂空白试验，如不干扰测定即可使用。否则需逐一检查进行重蒸。 3.8 苯一乙腋混合液:量取98ml,苯，加2mL乙睛混匀。 3.9 三氯甲烷一甲醇混合液:取97ml,三抓甲烷，3ml,甲醉混匀。 3.10 硅胶:柱层析用80 200目。 3.11硅胶G;薄层色谱用。 3.12 三氟乙酸。 3.13 无水硫酸钠(HG3- 123-76), 3.14 硅藻土。 3.15 黄曲霉毒素B，标准溶液 3.15.1 仪器校正:测定重铬酸钾溶液的摩尔消光系数，以求出使用仪器的校正因素:精密称取25mg 经千燥的重铬酸钾(基准级)。用。.009mol/L硫酸溶解后准确稀释至200ml,(相当于0.0004mol/L的 溶液) 再吸取25ml.此稀释液于50ml,容量瓶中，加。.009mol/L硫酸稀释至刻度 (相当于 0.0002mol/L溶液)。再吸取25mL此稀释液于50ml.容量瓶中，力J0.009mol/L硫酸稀释至刻度(相当 于0.0001mol/L溶液)。用lcm石英杯，在最大吸收峰的波长处(接近350nm)用0.009mo1/L硫酸作空 白，测得以上三种不同浓度的摩尔溶液的吸光度。并按下式计算出以上三种浓度的摩尔消光系数的平 中华人民共和国农牧渔业部1987一11一20批准 1988一12一01实施 免费标准下载网() 无需注册 即可下载 GB8381一87 均值。 F.=二 式中:F一一重铬酸钾溶液的摩尔消光系数; A 一测得重铬酸钾溶液的吸光度; ”一一重铬酸钾溶液的摩尔浓度 再以此平均值与重铬酸钾的摩尔消光系数值3160比较，按下式求出使用仪器的校正因素。 了- 3M160 ·(2) 式中:f-一使用仪器的校正因素; M-一测得重铬酸钾摩尔消光系数平均值。 若f大于。.95或小于1.05，则使用仪器的校正因素可略而不计。 3.15.2 10pg/mL黄曲霉毒素B、标准溶液的制备:精密称取1mg-1.2mg黄曲霉毒素B,标准品， 先加入2mL的乙睛溶解后，再用苯稀释至 100mL,置于4℃冰箱保存。 用紫外分光光度计Mali此标准溶液的最大吸收峰的波长及该迪长的吸光度值，并按下式计算该标准 溶液的浓度。 X,=AXMXE,1000Xf 式中 X,一黄曲霉毒素B标准溶液的浓度，pg/mL; A一一