比色法来测定食品蛋白质含量.pptVIP

Ⅲ.比色法测定食品蛋白质含量 一、方法的特点 与凯氏定氮法相比，用比色法测定生物材料中的蛋白质的含量，具有测定周期短、方便快捷的特点。此类方法是目前蛋白质含量测定的发展的必然趋势，但其测定结果的准确性和重现性比凯氏法要差些。 此外，本方法因对蛋白质在溶解性的要求而使其不具有通用性（“见方法的基本要求”）。 二、测定的依据和方法的种类 （一）方法的基本原理和依据 从生物遗传学角度看，同源蛋白质具有相同比例（或份额）的特征性基团，它们包括构成肽链的酰氨键、非α-氨基（碱性基团）、非末端竣基（酸性基团）和芳香族氨基酸等。随着蛋白质的含量的增加，其特征性基团的表现能力也随之呈现正相关的变化。因此，可以用通过凯氏定氮法已测定蛋白质含量的食品为标准样（称之与待测样具有同源蛋白质的标样），在其适合的条件下测定吸光度并制备标准吸收曲线。在相同条件下测同源的待测样品的光密度，然后从标准吸收曲线上查蛋白质的含量。 （二）方法的种类 比色法包括： 双缩脲法 紫外分光光度法 色素结合法 （三）比色法的基本要求 由于是用比色法测定蛋白质的含量，而比色法的测定液必须是真溶液，故要求采用此类方法的样品，其蛋白质是可溶的（对测试时使用的溶剂而言）。 在一般情况下，蛋白质的溶解是速度是比较低的，所以在进行样品预处理时应做剧烈振荡，从而使蛋白质充分地溶液于溶剂中。 要求用与待测样品具有同源蛋白质的标准制作标准曲线！！