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实验一 量效关系曲线测定 目的 用寇氏法测定LD50和 95 ％可信限 计算LD50 理解其药理学意义 条件 1. 剂量必须按等比级数（剂量对数按等级数）分组。 2. 各组动物数应相等。 3. “反应”应大致呈正态分布。最小剂量组的死亡率（ P n ）应为 0% ，最大剂量组的死亡率（ P m ）应为 100% ；如果 P n 20% 或 P m 80% 需用校正公式计算；如 P n 20% 或 P m 80%，则不能用此法计算。 试验方法 1．预备实验 （ 1 ）摸索上下限： 用少量动物逐步摸索出使全部动物死亡的最小剂量（LD 100 ）和一个动物也不死亡的最大剂量（ LD 0 ） 具体方法： 据经验或文献定出一个估计中值，观察 2～3只动物的死亡情况。如全死，则降低剂量；如全不死，则加大剂量再行摸索，直到找出 P m =100% 和 P n =0% 的剂量，此两量分别为上下限。 试验方法 （ 2 ）确定组数，组距及各组剂量 ① 组数： 一般5～8组，可根据适宜的组距确定组数。 ② 组距： 指相邻两组剂量对数剂量之差，常用“i”来表示。 i不宜过大，也不宜过小。 组距大小主要取决于实验动物对被试因素的敏感性。敏感性大者，组距可小些；敏感性小者，则组距应大些。上下限之间的距离可作为敏感性大小的标志。距离大，说明敏感性小；距离小，则说明敏感性大。 一般要求i应小于0.155，多在0.08～0.1之间。 试验方法 ③ 确定组距方法： 把上下限的剂量换算成对数值，设上限剂量的对数值 为 X m ，下限剂量的对数值为 X n ，组数为 n ，则： i ＝（Xm -X n） / （n-1） ④ 确定各组剂量： 由 Xn 逐次加 i （或由 X m 逐次减 i），得出各组剂 量的对数值，再分别查反对数，即得出各组剂量（呈 等比级数排列）。 试验方法 确定给药剂量： r＝n-1√LD100/LD0 r：各组剂量的公比；n：组数 求得r后，自第一剂量组LD0开始乘以r， 得相邻的下一个组的剂量，依次类推。 r与i的关系？ 试验方法 2．正式实验 （ 1 ）实验动物的选择与分组 ① 选择原则： 可根据不同实验而选取动物，应选择对被试因素敏感的动物。还要考虑动物来源，经济价值及操作简便等条件。 LD50 常用小白鼠进行实验来测得。 试验方法 ② 分组原则： 每组动物数必须多于组数。因为每组动物 数如少于组数，就不能充分反映各组死亡 率的差别。 ③ 分组方法： 首先，按性别将动物雌雄分开，然后随机分组。 试验方法 （ 2 ）给药、观察死亡数、求出死亡率 ① 给药途径： 可据不同药物及动物而定，小白鼠多用腹 腔注射或灌胃法；也可静脉注射。 ② 给药顺序： 间隔跳组方法。如共 7 组，先按 2 、 4 、 6 组顺序给药，然后逆行按 7 、 5 、 3 、 1 组的顺序给药。可避免药物 放置过久或动物饥饿造成的偏向性误差。 试验方法 ③ 观察时间： 直到动物不再因药物作用而死亡为止。 在观察期间应注意保证食、水、温度等生活条件，严防非被试因素引起的死亡。 最后将死亡情况及各种数据填入相应表格中。 试验方法 3. 计算公式 ① 基本公式 Xm：死亡率为 100﹪组的对数剂量；i：组距，即相邻两组剂量对数剂量之差；∑P：各组死亡率之和 试验方法 标准误 lg-1（lg LD50±1.96×Sx50） 实验材料 实验动物 小白鼠 18～22g 雌雄兼用 实验药品 盐酸普鲁卡因 实验器材 电子称 鼠笼 1ml注射器 试验方法 1. 取小鼠50只，称体重，按体重顺序编号，并染色，按随机区组设计法随机分为5组，每组10只。 2. 药液配制：按等比稀释法（1：K） V’=V/1-K V：各组需要的药物总体积；V’：所需母液的总体积；K=1/r 母液所需药量（M）= V ’ Dmax/(20ml/kg) 试验方法 给药剂量：290、234.9、190.3、154.1、121.3 mg/kg。 3. 腹腔注射0.2ml/10g。 4. 以呼吸停止为指标，记录死亡数。开始15 min内严密观察，准确结果为24 h内的死亡数 5. 整