绵羊痘病毒gy株的分离鉴定及靶向其rna聚合酶基因sirna的筛说选-兽医专业毕业论文.docx

优秀毕业论文 精品参考文献资料 No． No． Secrecy： Chinese Academy of Agricultural Sciences Dissertation Isolation and Identification of Sheeppox Virus Guyuan Strain and Screening of siRNA Targeting its RNA polymerase gene 一 M．S．Candidate：Wang Man Supervisor：Professor Zhang Qiang Degree：Master of Veterinarian Specialty：Veterinarian May 2015 万方数据 独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成 独创性声明 本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成 果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发 表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证 书而使用过的材料。与我一周工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了 明确的说明并表示了谢意。 研究生签名： 要曼 时间： 如{r年芗月哆日 关于论文使用授权的声明 本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定，即：中国农业科 学院有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩 印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用不同方式在不 同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。 研究生签名： 王曼 时间： 潮嗲年乡月l多昂 导师签名： 弓亏豹 lhJ：妇l岁年乡月l弓R 万方数据 中国农业科学院 中国农业科学院 硕士学位论文评阅人、答辩委员会签名表 绵羊瘾病毒GY株的分离鉴定及靶向其RNA聚合酶基因siRNA的筛 论文题目 涟 瘸原微生物及 论文作者 王曼 专 业 预防兽医 研究方向 其分子生物学 指导教师 张强研究员 培养单位(研究所) 兰州兽医研究所 硕(褥) 姓名 职称 单 位 专 业 签名 导师 评 硕导口 ＼＼＼ 趸缛 博导口 人 裔湃 ＼＼ 阅 硕导口 辩导口 答 辩 硕导口 甘肃农业大学动物医 主 胡永浩 教授 礴导矿 学院 预防兽医学 稍最赡 痛 孙晓林 教授 硕导留 1lj-’肃农业大学动物医 预防兽医学 五跚 博学口 学院 陈轶霞 教授 学与工程学院 预防兽医学 砟糯 硕导百 西北民族大学生命科 躲 博导口 答 硕导口 中圜农业科学院兰州 张志东 研究员 蹲导吝 兽医研究所 预防落医学 辩 副研究 硕导西 中圈农业科学院兰州 窦永喜 贝 博导口 兽医研究所 预防兽医学 ／爹渡 委 硕导口 员 博导口 硕导口 博导口 硕导口 媾导瞪 会议记蒙(秘书) 朱学亮 论文答辩时间地点 2015年5月13同予兰髑落医研究所综台楼三三楼会没室 万方数据 摘要绵羊痘病毒 摘要 绵羊痘病毒(Sheeppoxvirus，SPPV)、山羊痘病毒(Goatpoxvirus，GTPV)和疙瘩皮肤病 病毒(Lumpy skin disease virus，LSDV)为痘病毒科(Poxviridae)，脊椎动物痘病毒亚科 (Chordopoxvirinae)，羊痘病毒属(Capfipoxvirus，CaPV)成员，可分别感染绵羊、山羊和牛， 引起绵羊痘、山羊痘和牛结节性疹块病。近年来，绵羊痘在我国多地发生，大量绵羊患病死亡， 给养殖业带来极大的经济损失。SPPV的基因组在侵入宿主细胞前由衣壳保护，衣壳在病毒侵入 宿主细胞后，在适当的时间和位置被内在的环境所解离，使病毒基因组快速释放到细胞质中进行 复制。因此，SPPV能否在细胞中增殖的一个决定因素就是病毒能不能脱去衣壳。脱壳过程依赖 予RNA和蛋白质的合成。目前，引起绵羊痘病毒脱壳的脱壳蛋白的结构和功能及其编码基因， 以及转录脱壳蛋白的RNA聚合酶亚基尚不知晓。本研究在成功分离鉴定一株绵羊痘病毒的基础 上，初步进行了绵羊痘病毒RNA聚合酶基因的干扰的研究，为探究RNA聚合酶与脱壳的相关性 奠定了基础。 取发病绵羊的皮肤痘疹研磨制成病料样品悬液，将该悬液感染未免疫绵羊，同时接种原代羔 羊睾丸(LT)细胞，盲传5代后，转接Veto细胞，进行间接免疫荧光和PCR鉴定。样品悬液感 染未免疫绵羊后出现羊痘典型发病症状，经过LT细胞传代后转接Vero细胞，出现了特征性细胞 病变，免疫荧光和PCR均检测出病毒存在。PCR产物核酸序列测定结果显示，分离毒株的基因 片段与已发表的绵羊痘病毒毒株的相应基因片段同源性在99％以上。上述结果表明，本研究从宁 夏固原疑似羊痘病毒感染的