新霉素ELISA检测方法建立.PDFVIP

※分析检测 食品科学 2011, Vol. 32, No. 14 227 ELISA 1 , 2 1 3 3 1 , 刘沙洲 ，桑小雪 ，欧阳华学 ，雷绍荣 ，白林含 * (1. 四川大学生命科学学院，四川 成都 610065 ；2.成都市食品药品检测中心，四川 成都 610045 ； 3. 四川省农业科学院分析测试中心，四川 成都 610066) 目的：比较直接和间接竞争酶联免疫法(enzyme linked immunosorbent assay ，ELISA) 的优缺点，建立新霉 素残留 ELISA 检测方法。方法：利用自制的新霉素多克隆抗体，采用直接竞争和间接竞争 ELISA 方法检测新霉素 残留，并比较两种方法的优缺点。结果：新霉素抗血清和庆大霉素的交叉反应率为 2.04% ，和卡那霉素的交叉反 应率为 0.02% ，和氨苄青霉素、红霉素、四环素的交叉反应率均小于 0.01% 。初步测试新霉素间接竞争ELISA 法的准确性和回收率。板内误差小于 4% ，板间误差小于 11%，回收率为 135.5%～191.3% 。直接竞争和间接 竞争ELISA 方法的检测极限分别为28.58ng/mL 和 51.74ng/mL，达到了国家对新霉素规定的500μg/kg MRL 检测限。 结论：建立了直接竞争和间接ELISA 吸附检测方法，条件优化更成功的间接竞争ELISA 可用于开发新霉素检测试 剂盒 。 新霉素；多克隆抗体；竞争酶联免疫法(enzyme linked immunosorbent assay ，ELISA) ；方法建立 Development of Enzyme-linked Immunosorbent Assay for Neomycin 1,2 1 3 3 1, LIU Sha-zhou ，SANG Xiao-xue ，OUYANG Hua-xue ，LEI Shao-rong ，BAI Lin-han * (1. School of Life Sciences, Sichuan University, Chengdu 610065, China；2. Food and Drug Testing Center, Chengdu 610045, China ；3. Analysis and Testing Center, Sichuan Academy of Agricultural Sciences, Chengdu 610066, China) Abstract ：In this study, we describe the advantages and disadvantages of direct competitive enzyme-linked immunosorbent assay (dc-ELISA) and indirect competitive ELISA (idc-ELISA) and ELISA methods for the detection of neomycin. Anti- neomycin polyclonal antibodies were prepared and used to detect neomycin by dc-ELISA and idc-ELISA. The cross-reaction rates of prepared anti-neomycin polyclonal antibodies