现代生物技术与其应用.pdfVIP

第七章：现代生物技术 及其应用 7.1 生物技术概论 7.2 基因工程 7.3 蛋白质工程 7.4 细胞工程 7.1 生物技术概论 一. 生物技术的定义及内涵 • 生物技术是指应用生物科学及工程学原理，依靠 生物体系作反应器，将物料进行加工改造，获得 人类所需产品的技术。 • 现代生物技术：以现代生命科学为基础, 把生物 体系与工程学技术有机结合在一起，按照预先的 设计，定向地在不同水平上改造生物遗传性状或 加工生物原料, 产生对人类有用的新产品(或达到 某种目的)之综合性科学技术。 二、生物技术的内容 •医学生物技术 •药学生物技术 •动物生物技术 •农业生物技术 •海洋生物技术 •微生物生物技术 国家科委规定统计上报的十项工程内容 生物技术的上中下游 •上游工程 ：实验室研究和开发阶段，包括基因、 细胞、干细胞、转基因生物、组织工程等获得优 良菌株、细胞系或固定化的菌体等。 •中游工程：中游加工以生物反应器为中心，优化 和放大生产工艺。 •下游工程 ：从反应液中提取目的产物 加工精制 成合格产品。 7.2 基 因工程 1 基因工程的基本概念 重组DNA技术 • 重组DNA技术是指将一种生物体（供体）的基因与 载体在体外进行拼接重组。然后转入另一种生物体 （受体）内，使之按照人们的意愿稳定遗传并表达 出新产物或新性状的DNA体外操作程序，也称为分 子克隆技术。 • 供体、受体、载体是重组DNA技术的三大基本元件。 1 基因工程的基本概念 基因工程的基本定义 • 广义的基因工程是指重组DNA技术的产业化设计与 应用。包括上游技术和下游技术两大组成部分。 上游技术指的是基因重组、克隆和表达的设计与 构建（即重组DNA技术）；而下游技术则涉及到基 因工程菌或细胞的大规模培养以及基因产物的分 离纯化过程。 1 基因工程的基本概念 基因工程的基本形式 第一代基因工程 蛋白多肽、基因的高效表达 经典基因工程 第二代基因工程 蛋白编码基因的定向诱变 蛋白质工程 第三代基因工程 代谢信息途径的修饰重构 途径工程 第四代基因工程 基因组或染色体的转移 基因组工程 2 基因工程的基本原理 基因工程的支撑技术 核酸凝胶电泳技术 核酸分子杂交技术 细菌转化转染技术 DNA序列分析技术 寡核苷酸合成技术 基因定点突变技术 聚合酶链反应（PCR）技术 基因工程的基本条件 A 用于核酸操作的工具酶 B 用于基因克隆的载体 C 用于基因转移的受体菌或细胞 基因工程的基本条件 A 用于核酸操作的工具酶 限制性核酸内切酶 DNA连接酶 DNA聚合酶 核酸酶 核酸修饰酶 限制性核酸内切酶 • 限制性核酸内切酶的生物功能：识别双链DNA 分子中的特定序列，并切割DNA双链。 • 主要存在于原核细菌中，帮助细菌抑制外来 DNA的入侵。 • 细菌的限制与修饰作用：细菌自身的DNA在甲 基化酶的作用下被保护起来。