第十三题章蛋白质的生物合成.ppt

第十三章 蛋白质的生物合成 第一节 蛋白质的生物合成体系 第二节 核糖体 第三节 转移RNA(tRNA) 第四节 蛋白质的生物合成 遗传密码实际上是指mRNA中的核苷酸排列序列与蛋白质中的氨基酸排列序列的关系。 第三节 tRNA(转移RNA) 一. tRNA的结构 二. tRNA的功能 大肠杆菌蛋白质合成体系的重要组分 见教材P278表13—3。 蛋白质合成的基本过程 多个核蛋白体 DNA（遗传信息） 核膜 mRNA（模板） （装配机） 多个tRNA （搬运工具） 多核蛋白体 多个氨基酸（原料） 蛋白质（产品） mRNA E.Coli蛋白质的生物合成 (一).氨基酸的活化： 由高度特异的氨酰-tRNA合成酶 (aminoacyl-tRNA synthetase)催化，反应分两步 总反应式 (氨酰—AMP) (氨酰—AMP) (氨酰-tRNA) 氨酰—tRNA的分子结构 (二)．肽链的起始： mRNA中的起始密码是AUG，少数是GUG。 起始密码子的上游约10个核苷酸的地方往往有一段富含嘌呤的序列称SD序列（Shine-Dalgarno序列），一般为3～10个核苷酸，它与核糖体16srRNA 3ˊ端的核苷酸序列互补，可促使核糖体与mRNA的结合。 在E.Coli和其它原核生物中与这起始密码（AUG）相对应的tRNA是甲酰甲硫氨酰—tRNA（fMet-tRNAf Met），这是起始tRNA。 起始tRNA怎样形成？ 由甲硫氨酰-tRNA甲酰化 tRNA Met Met-tRNA 甲酰基转移酶 N10－甲酰FH4 FH4 （fMet－tRNAf） 甲酰基 ① ② 甲酰甲硫氨酰－tRNAf 甲酰基 Structure of N-formyl-methionyl-tRNA[Met] Differences with other tRNAs 细胞内有2种可携带Met的tRNA，它们都识别同样的AUG密码子，但它们的一级结构和功能不同。 2.tRNAmMet带上Met后不能甲酰化，用于肽链的内部，在肽链延伸中起作用。 1.tRNAf Met 带上Met后能甲酰化，是起始tRNA，用于肽链合成的起始。 所以AUG和GUG是兼职密码子，它们既可以作为起始密码子，作为肽链合成的起始信号，这时与之对应的氨基酸是甲酰Met。另外也可作肽链内部相应氨基酸的密码，这时AUG编码Met(甲硫氨酸),GUG编码val(缬氨酸)。 Met ATP/ Mg 2+ + tRNAm Met tRNAf Met Met-tRNAmMet Met-tRNAfMet fMet-tRNAfMet N10-Formyltetrahydrofolate Transformylase AMP/Mg2+ PPi The same aaRS AMP/Mg2+PPi 肽链合成的起始除了需要起始密码、SD序列、起始tRNA外还要三种起始因子。 （initiation factor），即IF-1， IF-2 和IF-3，还要消耗GTP，还需核糖体大小亚基参与，形成一个70S的真正起始复合物。 inactive 70S ribosome SD sequence 30S initiation complex 70S initiation complex GDP + Pi 肽链的延长需要一些延长因子或称延伸因子（elongation factor,EF）。 原核生物的EF有EF-T和EF-G两类: EF-T：延伸因子“T”，开始误认为这类延伸因子有肽基转移酶的活性(peptidyl transferase)，所以取转移酶的第一个字母“T”。 (三).肽链的延长： EF-T是由Tu和Ts两个亚基组成的二聚体。 EF-Ts：s是stable的意思，是稳定蛋白质。 EF-Tu: u是unstable，不稳定蛋白质。 EF-Tu直接参加了氨酰-tRNA与核糖体的结合。 EF-G：这类延伸因子与核糖体结合时需要GTP，当GTP水解时，这类延伸因子就从核糖体上解离下来，总之涉及GTP，所以用GTP的第一个字母“G”，EF-G。 1.氨酰-tRNA进入核糖体的A位 2.肽键的形成 3.移位 肽链的延长包括3步: 这是个比较复杂的过程，需Ts、Tu，还要消耗GTP。EF-Tu与GTP和氨酰-tNRA首先形成三元复合物，才能进入A位。 1. 氨酰-