第十三章蛋白质题的合成.ppt

第十三章 蛋白质的生物合成 目的与要求： 1、掌握翻译及蛋白质合成体系中的基本概念，如密码子、简并性等。 2、掌握蛋白质合成体系的组成及mRNA、tRNA和核蛋白体的作用原理。 3、复述蛋白质合成的过程。 4、掌握真核与原核蛋白质合成的异同及肽链合成后的加工过程。 蛋白质的生物合成过程，就是将DNA传递给mRNA的遗传信息，再具体转译为蛋白质中氨基酸排列顺序的过程，这一过程被称为翻译（translation）。 蛋白质生物合成主要学习的内容： 1、蛋白质生物合成体系 2、蛋白质生物合成机制 第一节 蛋白质合成体系 一、中心法则 即遗传信息通过DNA自我复制，传递到子代DNA分子上，在后代的个体发育过程中，遗传信息又可以从DNA传递给RNA，然后通过RNA指导合成特异的蛋白质，使后代表现出与亲代相似的遗传特征，DNA处于中心地位 。同时RNA也可以作为一种遗传物质进行自身复制，并通过逆转录把信息传递给DNA，这就是中心法则。 二、蛋白质合成体系 1、mRNA与遗传密码 （1）mRNA的作用 mRNA是蛋白质合成的直接模板，由它指导多肽链的合成。也就是说mRNA的结构决定蛋白质的结构，mRNA分子上的核苷酸顺序决定蛋白质分子中的氨基酸顺序。遗传信息的转换通过遗传密码来实现。 （2）遗传密码 遗传密码破译（一个三联体代表一个氨基酸的证明） 生物化学方法 用人工合成一个简单的多核苷酸作为mRNA，观察这种RNA可以指导合成怎样的多肽，就可以推测出氨基酸的密码。 1961年至1965年由Marshall Nirenberg（尼伦伯格）和Khorana（霍拉纳）在大肠杆菌无细胞体系中加入蛋白质合成的必需条件，如tRNA、氨基酰tRNA合成酶、ATP和用同位素标记的氨基酸混合物，在加上由多核苷酸磷酸化酶催化合成的多核苷酸（作为人工mRNA）来分析所生成多肽的氨基酸排序和种类。 方法一 ：以均聚物为模板指导多肽的合成 1961年，M.Nirenberg等人提出。 43 =64 大肠杆菌中，以多聚U做为mRNA，即polyU+20种放射性同位素标记的氨基酸，大肠杆菌合成体系，在外界环境合适下，合成了一条多聚苯丙氨酸（phe）肽链。这个实验结果证明UUU为phe的三联体密码。 用人工合成的多聚腺苷酸（polyA）做模板，结果有赖氨酸掺入，证明赖氨酸的密码子为AAA。同样，用多聚C做实验，证明CCC为脯氨酸的密码子。这样就很快解决了三个氨基酸的密码子。 方法二 ：以随机共聚物（两种或三种核苷酸随机结合）为模板指导多肽的合成 尼伦伯格和霍拉纳先后又作了以UA、UC、AC、AG、CG组成的共聚物及三种核苷酸如UGC、AGC、UAG等组成的共聚物为模板合成多肽的试验。从而破译了一些遗传密码。 方法三：  以特定核苷酸顺序的共聚物为模板指导多肽的合成  经过上述一些方法，于1965年完全查清了20种氨基酸的全部密码，并编制出了遗传密码字典，如下表： ③密码子的连续性（读码无标点、无重叠） 从正确起点开始至终止信号，密码子的排列是连续的。既不存在间隔（无标点），也无重叠。在mRNA分子上插入或删去一个碱基，会使该点以后的读码发生错误，称为移码，由这种情况引起的突变称为移码突变。 ④密码子的基本通用性（近于完全通用） 所有的生物使用同一套密码子，仅有少数例外，例如：线粒体起始密码子为AUG、AUU;终止密码为AGA，AGC；色氨酸为UGA等。密码的通用性进一步证明各种生物进化自同一祖先。 ⑤具有起始密码子和终止密码子 64种密码子中，AUG为甲硫氨酸的密码子，又是肽链合成的起始密码子，少数原核生物起始密码子为GUG。 UAA，UAG，UGA为终止密码子，不编码任何氨基酸，而成为肽链合成的终止部位（无义密码子）。 ⑥密码子的摆动性（变偶性） 如丙氨酸：GCU，GCC，GCA，GCG，只第三位不同 ，显然密码子的专一性基本取决于前两位碱基，第三位碱基有较大灵活性。发现tRNA上的反密码子与mRNA上的密码子配对时，密码子的第一位、第二位碱基配对是严格的，第三位碱基可以有一定变动，这种现象称为密码的摆动性或变偶性（wobble）。 值得注意的问题： 多肽合成的起始并不是从mRNA的5ˊ-末端的第一个核苷酸开始，而是位于5ˊ-末端第25个核苷酸残基以后开始的。在起始密码上游约10个核苷酸处（即-10区）通常有一段富含嘌呤的序列。这一叙列为SD序列。SD序列可以与小亚基16SrRNA3ˊ-末端的序列互补，使mRNA与小亚基结合。 (二)tRNA（转移RNA）