定性试西验质控.ppt

临床免疫定性试验室内质量控制 汪一萍 临床免疫检测类型 1）定量分析：确定被分析物的含量。 产生一个与待测分析物的浓度相关的光谱信号，如果有已知浓度的分析物制剂做校准，分析物的实际浓度就可以被确定。 2）定性分析：只关注分析物的有或无，而不关心有多少即定量。 又分为用肉眼和经验判断结果的纯定性试验和用读数仪根据CUT OFF 值或域值判定结果的量值化定性试验。阳性结果只说明分析信号超过了分析阈值（检测限）或cut-off值（cut-off值的设定给出了简要的敏感性和特异性组合）。一般针对感染原和来自天然感染或免疫接种的相关抗体的出现相关的检测。 一 质控目的 为满足检测的目的而采取一定的程序和方法监控和维持检测方法学或试剂盒的性能指标稳定在一定范围内，这个范围由实验室依据行业标准、临床需求、制造商规定以及实验室的实际设置。 免疫定量分析的室内质控方法参照临床化学的执行，本节只针对用读数仪根据CUT OFF 值或域值判定结果的量值化的标记免疫定性试验如ELISA、发光技术定性试验等。 分析性能（定性） CLSI文件规定： 1 灵敏度（分析和诊断） 2 特异性（分析和诊断） 3 符合率（诊断效率） 4 重复性（总不精密度） CUTOFF值的确定和验证 临床免疫定性试验的性能指标 灵敏度(sensitivity )： （1）分析灵敏度（Analytical sensitivity）也可用检测限（Detection limit）表述是指可以将样品中分析物检出的最少分析物的量。 （2) 诊断灵敏度(Clinical sensitivity)是指确诊的病人中检测结果为阳性或超过了检测限的病人的比例或指大量样本中阳性病人的检出能力。 特异性（Specificity）：分析特异性指实验方法只检测目的构成物的能力；临床特异性指实验只对样本中的特异的分析物起反应而不对的其它物质有反应的能力。 阳性预测值（Predictive value of a positive）：实际患病的受试者实验结果为阳性的概率。 阴性预测值（Predictive value of a negative）：实际未患病的受试者实验结果为阴性的概率。 符合率（Efficiency）：阳性或阴性结果中真实值的比例。 精密度（Precision）：在规定条件下,各测定值的符合程度。精密度不是作为数值来表示的，而是在数量上以不精密度的方式表示一系列重复检测结果的s和cv。 定性免疫检测的用途 筛选试验 用来检测全体人群或人群亚群一个特征的出现（如感染原或相关抗体的出现）。 一般要求趋向二个极端： 要么有高的临床敏感性（即超过95%的临床检出率），检测结果保证阴性筛选结果具有高可能性的没有这些特征，而阳性结果可能需要做进一步的确证试验；血站系统的传染病筛查属于此类。 要么有高的特异性，检测结果保证阳性筛选结果具有高可能性的具有这些特征。 诊断试验 用来评价具有可疑给予特征（如一种感染的特殊类型）的人。 敏感性和特异性应该处于相对平衡状态。如果此特征对治疗或预后考虑很重要，那么敏感性要尽可能的高；而且后续已有准确的确证试验，可以不需要高的特异性。 感染性疾病的大多数临床试验是用于诊断。 确证试验 获得筛选或诊断试验阳性结果后，增加的试验用于证明和确认此人前面的阳性结果。在这种情况下，主要考虑的性能常常是特异性和阳性预测值，而不是敏感性和阴性预测值；特异性应该超过98到99%。确证试验可以是非免疫化学的（如，培养或脱氧核糖核酸研究）或免疫化学的（包括免疫印迹和抗原或抗体中和试验）。 如果筛选和诊断试验已具有高的特异性和阳性预测值，则不需要确证试验。 英国HBV血清学诊断的SOP(V.SOP6) CUT OFF 值的选择 一个试验一般不可能有完全的（100%）敏感性、特异性或预测值。Cut off值的选择和来自一个检测的结果报告应该考虑这些性能指标哪个更重要。 下面是Galen和Gambino推荐的标准： （1）当疾病是严重的，并且是可治疗的，应该不能漏检；当假阳性结果不会导致严重的精神或经济创伤；和不合适的治疗有轻微的后果（如没有青霉素变态反应的，A群链球菌快速试验阳性个体的治疗）需要高敏感性。 （2）当疾病是严重的，但是不能治疗；当没有疾病时具有心理或公众健康价值；或如果假阳性结果可能引起严重的精神或经济上的创伤（如HIV抗体的确证试验）需要高特异性。 （3）当不合适的治疗可能导致严重后果，需要高预测值（如因为抗-风疹抗体水平的增加治疗失败）。 （4）当疾病严重但是可治疗，并且假阴性或假阳性结果同样严重（如引起脑膜炎细菌抗原的分析