生化检验第十二章骨代谢.pptVIP

第一节 骨代谢及其异常 一、钙（calcium, Ca）代谢及其异常 磷代谢 血液中的磷通常指血浆中的无机磷，80％～85％以HPO42-形式存在，正常成人血浆无机磷含量为0.81～1.45mmol/l。 磷在空肠吸收率达70%，主要由肾排泄。 儿童时期血磷高是由于儿童处于成骨旺盛期，碱性磷酸酶活性较高所致。 1. 1,25- (OH)2-D3的调节：升高血钙、血磷 1 降钙素的调节作用：降低血钙和血磷 成骨作用 （osteogenesis) PICP、PINP均可作为评价骨形成的指标。现多检测PICP 。 Ⅰ型胶原也是其他组织的主要基质，故敏感性和特异性不如骨钙素和B-ALP。 Pyr 存在于软骨，而D-Pyr主要来源于骨，所以D-Pyr有更高的特异性和灵敏度。 尿中Pyr和D-Pyr不受饮食和体力活动的影响，是反映骨胶原降解和骨吸收的最灵敏和特异的指标之一。 1.吡啶酚（pyridinoline，Pyr）和脱氧吡啶酚（deoxypydinoline, D-Pyr） 骨的有机基质中胶原交联90%为Ⅰ型胶原。 Pyr和D-Pyr是Ⅰ型胶原分子之间构成胶原纤维的交联物。 骨吸收期间Ⅰ型胶原被水解，生成的Pyr和D-Pyr释放入血，不经肝脏进一步降解而直接排泄到尿中，故可作为反映骨吸收的指标。 二、骨吸收标志物 二、骨吸收标志物 2. I型胶原C端肽(carboxy-terminal telopeptide of typeⅠcollagen, CTX)和N端肽（ N-terminal telopeptide of typeⅠcollagen, NTX）测定 CTX和NTX 均是Ⅰ型胶原分解的产物。 Ⅰ型胶原降解时， CTX与Ⅰ型胶原的降解按1：1释入血中 血清CTX水平是破骨细胞性胶原降解的灵敏指标。 骨吸收时，破骨细胞产生和分泌TRAP，释放入血。 血浆中TRAP水平，能反映破骨细胞活性和骨吸收情况。 3.抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase, TRAP) 尿HOP是体内胶原代谢的最终产物之一。 大约10%的羟脯氨酸在胶原分解时被释放从尿排出。 尿HOP浓度还受人体骨以外的其他组织和饮食中所含有的胶原的干扰。 所以尿HOP对骨更新或骨吸收不特异，不灵敏。 4.尿羟脯氨酸检测（hydroxyproline, HOP) 第四节 骨代谢异常的生物化学检测指标 （一）血清钙的测定 1.血清总钙（TCa2+）的测定 原子吸收分光光度法 IFCC推荐的参考方法 同位素稀释质谱法 IFCC推荐的决定性方法 一、血清钙、磷、镁检测 2.血清游离（离子）钙测定 离子选择性电极法(ISE) 目前应用最多，此方法简便、快速、重复性好，正确和敏感性高，已成为钙离子测定的参考方法。 （二）血清磷测定 还原钼蓝法 我国推荐的常规方法 黄嘌呤氧化酶法 WHO推荐的常规方法 同位素稀释质谱法 决定性方法 （三）血清镁测定 比色法 我国推荐MTB法钙镁试剂法作为常规方法　 原子吸收分光光度法(AAS) 参考方法 同位素稀释质谱法(ID-MS)等 决定性方法 血清镁测定 钙镁试剂是一种金属色原指示剂，在碱性溶液中与镁结合形成紫色复合物检测。 加入钙螯合剂EGTA可减少钙的干扰，减少蛋白质及血脂的干扰。 甲基麝香草酚蓝法：MTB与镁形成蓝色复合物，加入EGTA可减少钙的干扰。 （一）甲状旁腺激素测定 放射免疫法 化学发光免疫分析法 ELISA法是新近发展起来的方法，具有快速、灵敏、无同位素污染的优点. 二、骨代谢相关激素检测 （二）1,25- (OH)2-D3的测定 ELISA法 由于1,25- (OH)2-D3是血清中维生素D的主要活性形式 （三）血清降钙素测定 RIA 三、骨转换相关标志物检测 1.骨钙素测定 放射免疫法（ RIA法） 化学发光免疫分析法(CLIA) （一）骨形成标志物的检测 2.骨性碱性磷酸酶测定 （1）免疫活性测定法 （2）酶联免疫法 3. I型前胶原肽 I 型前胶原羧基端前肽 （PICP） I 型前胶原氨基端前肽 （PINP） 检测方法：放射免疫法（ RIA法）化学发光法 1.吡啶酚（PYD）和脱氧吡啶酚（DPD） 测定方法： ELISA法 （二）骨吸收标志物检测 2. I型胶原C端肽和N端肽测定 测定方法：ELISA法 3.耐酒石酸酸性磷酸酶 检测方法: 酶动力学法 酶联免疫法 4.尿羟脯氨酸检测（HOP） 测定方法： 氯胺T化学法 第五节 骨代谢